時(shí)間：2023-03-14 14:50:11
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關(guān)鍵詞：煙草工業(yè)；物流；一體化服務(wù)；管理評(píng)價(jià)體系
中圖分類號(hào)：F426.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1001-828X（2014）09-0096-01
引言
隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，煙草行業(yè)也在銷售、生產(chǎn)、物流方面尋求創(chuàng)新和進(jìn)步。隨著行業(yè)競(jìng)爭(zhēng)的加大和禁煙活動(dòng)的進(jìn)行，煙草行業(yè)面臨著空前挑戰(zhàn)。對(duì)煙草工業(yè)中的物流進(jìn)行改進(jìn)能夠在很大程度上提高煙草企業(yè)的競(jìng)爭(zhēng)實(shí)力，建構(gòu)煙草物流的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和管理機(jī)制成為了提高煙草物流服務(wù)質(zhì)量和管理效率的重要途徑。
一、一體化服務(wù)的概念
“一體化服務(wù)”是近些年來興起的概念，它是在“產(chǎn)品服務(wù)化”潮流中與“服務(wù)供應(yīng)鏈”概念融合而被提出的，注重產(chǎn)品的服務(wù)性，重視行業(yè)供應(yīng)鏈的整體互動(dòng)。在對(duì)行業(yè)價(jià)值鏈進(jìn)行優(yōu)化時(shí)，還需要對(duì)物流服務(wù)后向一體化、橫向一體化和前向一體化進(jìn)行革新，以使消費(fèi)者、零售商、商業(yè)企業(yè)和工業(yè)企業(yè)的利益實(shí)現(xiàn)最大化。
二、煙草工業(yè)中的物流一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理體系
在煙草行業(yè)中推行一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理體系，對(duì)煙草行業(yè)具有重要影響。本文將對(duì)這一評(píng)價(jià)管理體系的模型和實(shí)施策略進(jìn)行介紹。
2.1 煙草工業(yè)物流一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理體系模型
在對(duì)煙草工業(yè)物流一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理體系進(jìn)行建立時(shí)，應(yīng)引入“事前預(yù)警、事中控制、事后改進(jìn)”的管理理念，應(yīng)將改進(jìn)、追溯、評(píng)價(jià)、規(guī)范等關(guān)鍵物流環(huán)節(jié)使用科學(xué)的管理方法連接起來，并將這一評(píng)價(jià)管理體系運(yùn)用到整個(gè)煙草行業(yè)的管理服務(wù)中來。
煙草工業(yè)物流一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理體系模型包括三部分：智能追溯、服務(wù)考評(píng)、服務(wù)規(guī)范。這些環(huán)節(jié)在這個(gè)模型中都是很關(guān)鍵的，環(huán)環(huán)相扣，共同構(gòu)成了一體化服務(wù)的管理理念。
在煙草的物流配送中，其配送中心的服務(wù)規(guī)范的意義在于：1.對(duì)煙草物流服務(wù)提出引導(dǎo)性規(guī)范，提出了“事前規(guī)范預(yù)警”，能夠在事前對(duì)物流服務(wù)進(jìn)行規(guī)范；2.物流配送業(yè)務(wù)流程是與物流服務(wù)的評(píng)價(jià)是有密切聯(lián)系的，是以之為基礎(chǔ)構(gòu)建起來的。能否成功實(shí)行服務(wù)考評(píng)制度，其關(guān)鍵在于要建立完善的評(píng)價(jià)指標(biāo)體系，在供應(yīng)鏈、KPI、平衡計(jì)分卡等理論的指引下，綜合煙草物流的特點(diǎn)以及ISO、服務(wù)規(guī)范等對(duì)物流服務(wù)的質(zhì)量要求，建立起完善的、切實(shí)可行的評(píng)價(jià)方法。在服務(wù)評(píng)價(jià)結(jié)果的管理上，要對(duì)其評(píng)價(jià)結(jié)果進(jìn)行追溯管理，以實(shí)現(xiàn)“事后改進(jìn)”。
在這個(gè)服務(wù)評(píng)價(jià)管理系統(tǒng)中，構(gòu)成了一個(gè)循環(huán)回路，后向環(huán)節(jié)以前向環(huán)節(jié)為基礎(chǔ)，前向環(huán)節(jié)依據(jù)后向環(huán)節(jié)進(jìn)行改善，并提出改進(jìn)方法和改進(jìn)方向，不斷優(yōu)化一體化服務(wù)體系，實(shí)現(xiàn)動(dòng)態(tài)的服務(wù)評(píng)價(jià)管理。
2.2 管理體系中的重要環(huán)節(jié)
2.2.1 煙草行業(yè)物流規(guī)范
煙草行業(yè)物流規(guī)范中對(duì)煙草物流服務(wù)的質(zhì)量和效率提出了合理科學(xué)的保障、警示、指導(dǎo)和支持。物流規(guī)范對(duì)煙草的“配送”、“分揀”、“倉(cāng)儲(chǔ)”等環(huán)節(jié)都有重要的支持和規(guī)范作用，以基本完成物流服務(wù)任務(wù)為前提，對(duì)煙草工業(yè)中所涉及的物流環(huán)節(jié)的安全、人員培訓(xùn)、投訴建議等都進(jìn)行了流程和任務(wù)上的規(guī)定。煙草工業(yè)中的物流業(yè)務(wù)，不僅要從生產(chǎn)實(shí)際出發(fā)，還要對(duì)其可行性、全面性、細(xì)致性進(jìn)行深入探討和研究，避免在管理中出現(xiàn)晦澀、片面和粗獷的管理方式，提升煙草物流一體化服務(wù)的質(zhì)量。
2.2.2 煙草行業(yè)物流服務(wù)評(píng)價(jià)指標(biāo)
服務(wù)評(píng)價(jià)指標(biāo)是煙草工業(yè)物流一體化服務(wù)體系的核心，是對(duì)“事中控制”進(jìn)行管理的主要標(biāo)準(zhǔn)，是實(shí)現(xiàn)一體化服務(wù)的關(guān)鍵所在。建立起來的一體化服務(wù)評(píng)價(jià)指標(biāo)體系應(yīng)該具有較為良好的定性指標(biāo)和定量指標(biāo)，具有較高的可比性、可行性和較為全面的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。評(píng)價(jià)指標(biāo)應(yīng)以科學(xué)理論為導(dǎo)向，基于實(shí)踐，對(duì)煙草生產(chǎn)和配送過程中的物流服務(wù)進(jìn)行管理。除此之外，還應(yīng)注意對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的細(xì)化，對(duì)應(yīng)依據(jù)指標(biāo)的性質(zhì)和指標(biāo)的巨細(xì)程度對(duì)指標(biāo)進(jìn)行合理細(xì)化，并標(biāo)明合格標(biāo)準(zhǔn)與評(píng)判方法。
2.2.3 煙草行業(yè)評(píng)價(jià)結(jié)果與智能追溯管理
制定和實(shí)現(xiàn)物流一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理體系不是目的，而是一種手段，其目的在要提高煙草物流的質(zhì)量，提升煙草物流的服務(wù)效率。在對(duì)該系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)施和改進(jìn)時(shí)，應(yīng)注重發(fā)現(xiàn)問題、分析問題、解決問題，注重對(duì)評(píng)價(jià)結(jié)果的追溯，尋找出物流效率提高或下降的原因，并給予合理和及時(shí)的解決。
三、實(shí)行煙草工業(yè)物流一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理系統(tǒng)的措施
在煙草物流中實(shí)施一體化服務(wù)評(píng)價(jià)管理體系，需要注意：
應(yīng)該網(wǎng)絡(luò)信息技術(shù)，充分發(fā)揮計(jì)算機(jī)的功能，對(duì)管理實(shí)行標(biāo)準(zhǔn)化操作；
對(duì)管理實(shí)行智能化和自動(dòng)化，開發(fā)和使用專用的物流軟件，對(duì)物流數(shù)據(jù)信息進(jìn)行記錄、反饋、統(tǒng)計(jì)和分析；
聘用和培養(yǎng)綜合性與專業(yè)型人才，組建管理小組專門對(duì)物流服務(wù)的評(píng)價(jià)和組織進(jìn)行管理。
方法：選取72例患者隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組給予常規(guī)藥物和無創(chuàng)通氣治療，研究組在此治療基礎(chǔ)上加服益氣活血化痰的中藥。比較兩組治療后效果，包括動(dòng)脈血?dú)庵衟H，PaCO2，PaO2的改善情況，綜合療效及住院天數(shù)。
結(jié)果：研究組總有效率為91.18%；對(duì)照組總有效率84.38%，兩組治療前后的pH無明顯變化，但研究組較對(duì)照組在PaCO2，PaO2指標(biāo)的改善程度上要更為明顯，研究組的住院天數(shù)較對(duì)照組明顯縮短（P
結(jié)論：益氣活血化痰法聯(lián)合無創(chuàng)輔助通氣治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭患者，有效地借助中醫(yī)優(yōu)勢(shì)，取得了中西醫(yī)互補(bǔ)的作用效果，提高了慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭治療的臨床效果。
關(guān)鍵詞：無創(chuàng)輔助通氣 益氣活血化痰法 慢性阻塞性肺病 呼吸衰竭
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.11.532
【中圖分類號(hào)】R2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2014）11-0314-02
慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并呼吸衰竭一直是臨床上的難治之癥，以往慣用有創(chuàng)機(jī)械為患者建立人工氣道，但鑒于有創(chuàng)機(jī)械存在的各種損傷和并發(fā)癥，患者也會(huì)承受一定的痛苦而備受爭(zhēng)議；無創(chuàng)機(jī)械通氣的雖能減少患者的不適感，但要想發(fā)揮療效，還得需要一定的呼吸中樞敏感性和呼吸肌的力量配合完成。本研究的目的借助中醫(yī)的手段，通過中西醫(yī)互補(bǔ)的方式對(duì)患者進(jìn)行對(duì)照性的治療，通過治療手段和效果的比較，來提高治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭的臨床療效。具體是將益氣活血化痰法與無創(chuàng)機(jī)械通氣相配合治療對(duì)患者進(jìn)行治療，對(duì)臨床療效、住院天數(shù)等數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，使中醫(yī)藥治療與機(jī)械通氣治療“雙劍合璧”，達(dá)到更為理想的治療效果。
1 資料與方法
1.1 一般資料。收集2011年9月至2012年12月在我院呼吸內(nèi)科進(jìn)行治療，符合臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)的住院病人72例，隨機(jī)將病人分為兩組，研究組和對(duì)照組均為36例。研究組男27例，女9例，平均年齡71.43±7.6歲，其中包括11例I型呼吸衰竭，25例II型呼吸衰竭；對(duì)照組男30例，女6例，平均年齡72.7±9.5歲，其中15例I型呼吸衰竭，21例II型呼吸衰竭。兩組患者的平均年齡和性別分布無顯著性差異，P>0.05，具有可比性。
1.2 方法。兩組患者均服用抗生素、化痰藥及支氣管解攣劑等常規(guī)藥物，同時(shí)接受無創(chuàng)通氣治療。吸入氧的濃度為30%。每次通氣2小時(shí)，每天2次。
研究組在以上的治療基礎(chǔ)之上，還要同時(shí)服用活血化痰中藥和保元湯。主要成分包括黨參、茯苓、桔梗、黃芪、桑白皮、陳皮、法半夏、白術(shù)、補(bǔ)骨脂、杏仁、丹參、甘草、川芎。
每日開水沖服一劑，分3次服下，10天為一個(gè)療程。
1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)。在治療前對(duì)兩組患者進(jìn)行觀察，得到中醫(yī)證候積分 [2]，同時(shí)測(cè)動(dòng)脈血?dú)庵械膒H值，血液中氧氣分壓PaO2和二氧化碳分壓PaCO2。治療后的第3天和第10天以同樣方法進(jìn)行測(cè)定，觀察動(dòng)脈血?dú)馐欠窀纳?、中醫(yī)證侯積分及患者住院天數(shù)的變化。
臨床判定的標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》來擬定 [3]。具體等級(jí)分為顯效、有效和無效。其中臨床癥狀及體征有明顯的改善，證候積分減少70%以上為顯效；臨床癥狀及體征均有好轉(zhuǎn)，證候積分減少30%以上的為有效；臨床癥狀及體征均無明顯改善，證候積分減少小于30%的視為無效。
1.4 數(shù)據(jù)處理。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析，各項(xiàng)指標(biāo)采用X±S表示，組間數(shù)據(jù)采用t檢驗(yàn)。P
2 結(jié)果
2.1 兩組動(dòng)脈血?dú)庵衟H，PaCO2，PaO2的比較。兩組患者在治療前后的pH無明顯差異；兩組治療后的PaCO2發(fā)生明顯降低，而PaO2發(fā)生明顯升高（P
2.2 中醫(yī)證候療效評(píng)價(jià)。兩組總療效的比較結(jié)果，研究組36例，顯效21例，有效12例，無效3例，總有效率為91.67%；對(duì)照組36例，顯效11例，有效16，無效9例，總有效率75%。兩組的臨床療效具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。具體數(shù)據(jù)見表2。
2.3 住院天數(shù)比較。研究組住院天數(shù)15.92d，對(duì)照組住院天數(shù)19.21天，結(jié)果顯示研究組的住院天數(shù)明顯少于對(duì)照組，數(shù)據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
表1 兩組動(dòng)脈血?dú)庵衟H，PaCO2，PaO2的比較（X±S）
注：與0天相比，P
表2 兩組總療效比較（X±S）
注：與0天相比，P
3 討論
根據(jù)中醫(yī)學(xué)的觀點(diǎn)，氣虛是導(dǎo)致慢性阻塞性肺疾病反復(fù)發(fā)作的主要原因，瘀血和痰濁等癥狀則是慢性阻塞性肺疾病的主要病理因素。益氣活血化痰方配合保元湯就是針對(duì)患者氣虛的根源所擬定的中藥配方，方中君藥選用黃芪、黨參起到補(bǔ)益肺脾的作用；法半夏、茯苓、陳皮能夠起到化痰之功效；臣藥選擇丹參、川芎，能夠活血化瘀；配以宣肺化痰的桔梗，桑白皮、杏仁和甘草，將補(bǔ)氣藥與活血化痰藥進(jìn)行了巧妙融合，達(dá)到標(biāo)本兼治的目的。
本研究采用益氣活血化痰方配合無創(chuàng)機(jī)械通氣治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期的呼吸衰竭患者，與以往單純采用西醫(yī)常規(guī)藥物的治療方法相比，本方法具有更高的治療有效率，PaCO2和PaO2等血?dú)庵笜?biāo)有較大程度的改善，不僅減少了患者的痛苦，也通過縮短患者的住院天數(shù)減輕其經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。說明中西醫(yī)結(jié)合的益氣活血化痰法配合無創(chuàng)機(jī)械通氣治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭的治療是有重要意義的。
參考文獻(xiàn)
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[3] .中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2002：392
【摘要】 目的 研究分析青島地區(qū)EB病毒(EBV)相關(guān)胃癌及鼻咽癌組織中EBV主要潛伏期編碼基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)。方法 采用甲基化特異性PCR(MSP)及亞硫酸氫鹽基因組測(cè)序法(BGS)，分析32例EBV相關(guān)胃癌及20例EBV陽性鼻咽癌標(biāo)本中編碼EBV核抗原EBNAs基因的啟動(dòng)子Cp、Wp、Qp以及LMP1和LMP2A編碼基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)。結(jié)果 EBV相關(guān)胃癌及鼻咽癌腫瘤標(biāo)本中EBV編碼基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)與腫瘤細(xì)胞的潛伏感染類型一致：Cp和Wp呈高甲基化狀態(tài)，而Qp未發(fā)生甲基化;2種EBV陽性腫瘤標(biāo)本中LMP1和LMP2A編碼基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)有所不同，兩者在EBV相關(guān)胃癌組織甲基化程度明顯高于其在EBV陽性的鼻咽癌(χ2=19.15、11.01，P
【關(guān)鍵詞】 皰疹病毒4型，人;胃腫瘤;鼻咽腫瘤;DNA甲基化;啟動(dòng)區(qū)(遺傳學(xué))
[ABSTRACT] Objective To study and analyze the methylation status of major EpsteinBarr virus (EBV) latency promoters in EBVassociated gastric carcinoma (EBVaGC) and nasopharyngeal carcinoma (NPC) in Qingdao area. Methods Methylation status of specific CpG sites of Cp， Wp， Qp， LMP1 promoter (LMP1p) and LMP2A promoter (LMP2Ap) was systematically detected in 32 EBVaGCs and 20 NPCs by bisulfite genomic sequencing (BGS) and methylationspecific PCR (MSP). Results The methylation status of these promoters in EBVaGC was consistent with NPC. Wp and Cp were hypermethylated， whereas Qp was unmethylated; The methylation status of LMP1p and LMP2Ap in EBVaGC was different from NPC: the methylation rates of LMP1p and LMp2Ap in EBVaGC were significantly higher than those in NPC (χ2=19.15，11.01;P
[KEY WORDS] herpesvirus 4， human; stomach neoplasms; nasopharyngeal neoplasms; DNA methylation; promoter region (genetics)
EB病毒(EBV)屬皰疹病毒科γ皰疹病毒亞科成員，95%以上健康成人攜帶EBV，與人類多種腫瘤如鼻咽癌、BURKITT淋巴瘤、HODGKIN病、胃癌等密切相關(guān)[12]。不同EBV相關(guān)腫瘤組織和EBV陽性細(xì)胞系中病毒基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)形式有所不同，在EBV潛伏感染細(xì)胞中，可表達(dá)的病毒基因有10多種，如EBV核抗原(EBNA)1、2、3A、3B、3C和LP，潛伏膜蛋白(LMP)1、2A和2B，EBV編碼的小RNA(EBER)1和2以及BARF0的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。根據(jù)EBV潛伏期基因表達(dá)形式不同分為潛伏Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型3種潛伏類型。EBV相關(guān)胃癌和BURKITT淋巴瘤組織均可以檢測(cè)到潛伏期基因EBNA1、EBERs、LMP2A、BARF0的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，為潛伏Ⅰ型。除了上述基因以外，在鼻咽癌組織、HODGKIN病中還可檢測(cè)到LMP1的表達(dá)者為Ⅱ型潛伏。體外EBV永生化的B淋巴母細(xì)胞系(LCL)可檢測(cè)到包括6種EBNAs和3種LMPs等在內(nèi)的大部分EBV潛伏期基因的表達(dá)，稱為Ⅲ型潛伏。研究表明，EBV相關(guān)胃癌及鼻咽癌組織中病毒基因表現(xiàn)為限制性表達(dá)，推測(cè)EBV可能通過表觀遺傳機(jī)制調(diào)控病毒基因啟動(dòng)子，尤其是通過其甲基化狀態(tài)來調(diào)控病毒基因的表達(dá)[3]。研究顯示，EBV編碼基因啟動(dòng)子序列中CpG位點(diǎn)甲基化可抑制相應(yīng)基因的表達(dá)，但這些研究主要集中在淋巴細(xì)胞來源的EBV陽性腫瘤和細(xì)胞系。本實(shí)驗(yàn)選擇上皮來源的EBV相關(guān)胃癌和EBV陽性鼻咽癌作為研究對(duì)象，檢測(cè)其EBV主要潛伏期基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)，為深入探討EBV相關(guān)腫瘤的發(fā)生機(jī)制及防治提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
1 材料和方法
1.1 細(xì)胞系
EBV陽性Akata、Raji和B958細(xì)胞系由日本鳥取大學(xué)醫(yī)學(xué)部生體情報(bào)學(xué)教室西連寺剛教授惠贈(zèng)，分別為潛伏Ⅰ型、潛伏Ⅲ型Burkitt淋巴瘤細(xì)胞系，EBV永生化的潛伏Ⅲ型LCL細(xì)胞系用作該實(shí)驗(yàn)的對(duì)照細(xì)胞。上述細(xì)胞用含有體積分?jǐn)?shù)0.10的胎牛血清、105 U /L青霉素和100 mg /L鏈霉素的RPMI 1640營(yíng)養(yǎng)液，于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
1.2 腫瘤標(biāo)本
新鮮胃癌組織和石蠟包埋鼻咽癌組織取自青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院﹑蓬萊市人民醫(yī)院和煙臺(tái)毓璜頂醫(yī)院。采用原位雜交檢測(cè)石蠟組織切片中EBV編碼的小分子非多聚腺苷酸EBER1的轉(zhuǎn)錄[4]，篩選出32例EBV陽性胃癌和20例EBV陽性鼻咽癌標(biāo)本。
1.3 DNA提取
采用酚氯仿異戊醇抽提法常規(guī)提取新鮮胃癌組織DNA，采用QIAamp DNA FFPE試劑盒提取石蠟包埋鼻咽癌組織DNA，具體操作步驟按試劑盒(QIAamp tissue kit， Qiagen， Hilden， Germany)說明進(jìn)行。
1.4 DNA處理
取30 μL上述提取的組織DNA (2～5 μg)，加33 μL新鮮配制3 mol/L的NaOH溶液混勻變性，置37 ℃水浴15 min;將新鮮配制的亞硫酸鹽溶液(2.4 mol/L 亞硫酸鈉，pH 5.0～5.2;0.5 mmol/L 氫醌與3 mol/L NaOH的混合液)333 μL加入變性DNA中進(jìn)行修飾，55 ℃避光孵育4 h。修飾后的DNA脫鹽純化處理按照DNA純化試劑盒(Qiagen， Hilden， Germany)說明操作步驟進(jìn)行;脫鹽純化的DNA溶于50 μL TE緩沖液中，室溫下靜置5 min。再加入3 mol/L的NaOH 5.56 μL，37 ℃水浴15 min，使其脫磺化基團(tuán)。將純化后DNA溶解于100 μL TE緩沖液中，-20 ℃保存?zhèn)溆肹5]。
1.5 甲基化特異性PCR(MSP)
以亞硫酸氫鹽修飾的組織DNA作為模板進(jìn)行MSP，甲基化特異性引物、未甲基化特異性引物以及MSP產(chǎn)物大小見表1，其中Wp和Cp特異性引物參考文獻(xiàn)[56]設(shè)計(jì)，Qp、LMP1 和 LMP2A啟動(dòng)子特異性引物采用MethPrimer軟件進(jìn)行在線設(shè)計(jì)。 PCR反應(yīng)體積為25 μL，包括DNA模板2 μL，1.25 U熱啟動(dòng)酶TaKaRa，1.5 mmol/L MgCl2，0.2 nmol/L dNTP 和0.6 mmol/L引物。反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性5～10 min;然后95 ℃變性30 s，最適溫度退火30 s，72 ℃延伸1 min，共38個(gè)循環(huán);最后72 ℃延伸10 min。擴(kuò)增產(chǎn)物置20 g/L的瓊脂糖凝膠上電泳，紫外線凝膠成像系統(tǒng)記錄分析結(jié)果。EBV陽性Akata、Raji和B958細(xì)胞系DNA 作陽性對(duì)照，EBV陰性Ramos細(xì)胞DNA作陰性對(duì)照。
1.6 亞硫酸鹽基因測(cè)序
為進(jìn)一步檢測(cè)LMP1和LMP2A啟動(dòng)子區(qū)域CpG位點(diǎn)具體甲基化狀態(tài)，并驗(yàn)證MSP結(jié)果，參考文獻(xiàn)設(shè)計(jì)引物行亞硫酸鹽基因組測(cè)序(BGS)[78]，該引物序列位于MSP引物序列外側(cè)，見表2。PCR反應(yīng)體積為25 μL，包括亞硫酸氫鈉修飾的DNA模板2 μL，1 U熱啟動(dòng)DNA聚合酶TaKaRa，1.5 mmol/L MgCl2，0.2 nmol/L dNTP和0.6 mmol/L 引物。反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性5 min;然后95 ℃變性30 s，最適溫度退火30 s，72 ℃延伸1 min，共38個(gè)循環(huán);最后72 ℃延伸10 min。擴(kuò)增產(chǎn)物置20 g/L的瓊脂糖凝膠上電泳，紫外線凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果后送測(cè)序。表1 甲基化特異性PCR引物啟引物類型核酸序列表2 BGS測(cè)序引物引物類型核酸序列B958對(duì)應(yīng)序列退火溫度
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用PPMS 1.5[9]統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料的比較采用校正χ2檢驗(yàn)及χ2檢驗(yàn)。
2 結(jié) 果
2.1 Cp、Wp及Qp甲基化檢測(cè)
MSP檢測(cè)結(jié)果顯示，B958細(xì)胞中未檢測(cè)到Cp的甲基化，Raji細(xì)胞中Cp高甲基化，但在Akata細(xì)胞系中同時(shí)檢測(cè)到甲基化和未甲基化的Cp。Raji和Akata細(xì)胞系中Wp呈高甲基化，但在B958細(xì)胞系中則呈部分未甲基化現(xiàn)象;3種細(xì)胞系中均未檢測(cè)到Qp的甲基化。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的52例EBV陽性腫瘤組織均表現(xiàn)為Cp和Wp高甲基化狀態(tài)，而Qp呈低甲基化狀態(tài)。MSP檢測(cè)3種細(xì)胞系和部分EBV陽性標(biāo)本W(wǎng)p、Cp及Qp甲基化狀態(tài)的電泳結(jié)果見圖1～3。
2.2 LMP1基因啟動(dòng)子甲基化檢測(cè)
MSP檢測(cè)結(jié)果顯示，32例EBV相關(guān)胃癌組織中LMP1啟動(dòng)子均呈高甲基化狀態(tài);20例鼻咽癌標(biāo)本檢測(cè)到3種MSP結(jié)果類型，其中包括M型9例(45%)、U型6例(30%)，M+U型5例(25%)，結(jié)果見表3。圖4為MSP檢測(cè)2種EBV陽性細(xì)胞系和部分EBV陽性標(biāo)本LMP1啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)的電泳結(jié)果。BGS檢測(cè)結(jié)果顯示：B958和Akata細(xì)胞系LMP1編碼基因啟動(dòng)子區(qū)的25個(gè)CpG位點(diǎn)均沒有發(fā)生甲基化;EBV陽性腫瘤組織的檢測(cè)結(jié)果與MSP結(jié)果基本一致，除N43外，其余標(biāo)本該區(qū)域25個(gè)CpG位點(diǎn)呈甲基化狀態(tài)。見表4。
2.3 LMP2A基因啟動(dòng)子甲基化檢測(cè)
MSP檢測(cè)結(jié)果表明，在84.38% (27/32)EBV相關(guān)胃癌和40%(8/20)的鼻咽癌標(biāo)本中，LMP2A編碼基因啟動(dòng)子表現(xiàn)為高甲基化，結(jié)果見表3和圖5。BGS檢測(cè)的結(jié)果顯示，B958和Akata細(xì)胞系LMP2A編碼基因中啟動(dòng)子區(qū)的20個(gè)CpG位點(diǎn)均沒有發(fā)生甲基化;EBV陽性腫瘤組織的檢測(cè)結(jié)果與
Q7、Q31、Y13A 為EBV陽性胃癌標(biāo)本，N31、N43為EBV陽性鼻咽癌標(biāo)本，Akata、Raji、B958為EBV陽性細(xì)胞系。M代表采用甲基化特異性引物M1/M2的PCR結(jié)果，U為采用甲基化特異性U1/U2引物的PCR結(jié)果。表3 MSP檢測(cè)EBV編碼基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)啟動(dòng)子類型甲基化類型EBVaGC(例)EBV陽性NPC(例)
MSP檢測(cè)結(jié)果基本一致。見表4。BGS測(cè)序結(jié)果證實(shí)，5例MSP結(jié)果呈U+M的EBV陽性腫瘤標(biāo)本(Q215、DA53、DA78、DA93和N36)中，LMP2A啟動(dòng)子區(qū)域CpG位點(diǎn)呈部分甲基化。在3例EBV陽性胃癌標(biāo)本(DA53、DA78和DA93)中，LMP2A編碼基因部分CpG位點(diǎn)存在2種不同的甲基化形式，即甲基化(C)與未甲基化(T)同時(shí)存在(圖6)。
2.4 LMP1和LMP2A基因啟動(dòng)子在EBV陽性胃癌和鼻咽癌中的甲基化率
EBV陽性胃癌組織中LMP1和LMP2A基因啟動(dòng)子甲基化陽性率明顯高于鼻咽癌組織，差異有顯著性(χ2=19.15、11.01，P
圖5 MSP檢測(cè)LMP2A編碼基因啟動(dòng)子甲基化電泳結(jié)果
圖中序列276對(duì)應(yīng)表4中的CpG位點(diǎn)是14，287對(duì)應(yīng)的CpG位點(diǎn)是15，310、313、315對(duì)應(yīng)的CpG位點(diǎn)分別是16、17、18。如圖所見位點(diǎn)14、15存在兩種波峰，提示C與T同時(shí)存在;位點(diǎn)16、17、18僅一種波峰，即C。表5 EBV陽性胃癌和鼻咽癌中LMP1p和LMP2Ap甲基化率的比較組 別nLMP1p陽性(例)陰性(例)甲基化率
3 討 論
基因表達(dá)調(diào)控區(qū)域的DNA序列發(fā)生化學(xué)修飾可影響基因表達(dá)，DNA甲基化是最重要的修飾形式之一。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，EBV相關(guān)胃癌和EBV陽性鼻咽癌組織中，病毒基因表達(dá)調(diào)控區(qū)DNA的甲基化與EBV潛伏期基因的表達(dá)密切相關(guān)。
編碼EBV核抗原EBNAs的啟動(dòng)子包括Wp、Cp和Qp，其中Wp和Cp為EBNAs的共同轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子，可轉(zhuǎn)錄合成全部6種EBNAs mRNA，而Qp為EBNA1的專有啟動(dòng)子，選擇性轉(zhuǎn)錄合成EBNA1 mRNA。EBNAs在EBV相關(guān)胃癌及鼻咽癌組織中表達(dá)類型相同，僅EBNA1表達(dá)，其表達(dá)受Cp、Wp和Qp等3種啟動(dòng)子調(diào)控[10]。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，Wp和Cp引物序列所含CpG位點(diǎn)的甲基化狀態(tài)可很好地反映啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)[56]。本研究MSP檢測(cè)結(jié)果顯示，在EBV相關(guān)胃癌及鼻咽癌組織中Wp和Cp表現(xiàn)為高甲基化，而Qp則未發(fā)生甲基化，表明潛伏Ⅰ和Ⅱ型EBV陽性腫瘤組織中EBNA1的表達(dá)由未甲基化的Qp啟動(dòng)[1112]。由此可見，啟動(dòng)子區(qū)域CpG位點(diǎn)甲基化狀態(tài)與EBV基因表達(dá)密切相關(guān)，并呈反向關(guān)系，即DNA甲基化一般抑制基因表達(dá);而非甲基化一般與基因的活化相關(guān)。
通常認(rèn)為在潛伏Ⅲ型細(xì)胞系中，EBNAs的表達(dá)受Wp/Cp調(diào)控，而Qp處于沉默狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在B958細(xì)胞系中Wp、Cp和Qp均呈低甲基化狀態(tài)，表明EBNA1的表達(dá)由三者共同調(diào)控，其他EBNAs的表達(dá)則由Wp/Cp調(diào)控。研究證實(shí)，Raji細(xì)胞所有Ⅲ型潛伏基因均表達(dá)，理論上6種EBNAs mRNA的轉(zhuǎn)錄表達(dá)是由Wp/Cp啟動(dòng)，但本研究顯示Raji細(xì)胞系中Wp和Cp呈高甲基化狀態(tài)，提示EBNA1的表達(dá)受Qp調(diào)控，其他EBNAs的表達(dá)不受Wp/Cp調(diào)控，推測(cè)Raji細(xì)胞系中EBNAs的表達(dá)存在其他調(diào)控機(jī)制。研究顯示，EBV陽性BL細(xì)胞系在體外培養(yǎng)時(shí)易發(fā)生表型改變，如EBV核抗原表達(dá)的改變，早期傳代病毒基因表達(dá)呈高度限制性，僅EBNA1表達(dá);隨著傳代次數(shù)的增多晚期至少表達(dá)9種不同的病毒蛋白(EBNA1、2、3A、3B、3C，LP，LMP1、2A、2B)[1314]。我們的結(jié)果也顯示，Akata細(xì)胞系Cp區(qū)域有少量CpG位點(diǎn)未發(fā)生甲基化，而且Akata細(xì)胞系LMP1和LMP2A編碼基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)也反映出其在體外培養(yǎng)過程中發(fā)生了表型改變。推測(cè)體外細(xì)胞培養(yǎng)條件與人體內(nèi)環(huán)境明顯不同，缺乏免疫監(jiān)視，對(duì)細(xì)胞系的研究可反映但不能代表原始腫瘤組織中EBV主要潛伏期編碼基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)，因此有必要對(duì)原始腫瘤組織標(biāo)本進(jìn)行研究。
BGS檢測(cè)LMP1和LMP2A啟動(dòng)子區(qū)域CpG位點(diǎn)甲基化結(jié)果表明，2種上皮來源的EBV陽性腫瘤組織中存在病毒基因啟動(dòng)子不完全甲基化現(xiàn)象。1996年，ROBERTSON等[14]在對(duì)EBV陽性BURKITT淋巴瘤和HODGKIN病腫瘤組織中Cp甲基化狀態(tài)進(jìn)行研究時(shí)就發(fā)現(xiàn)存在不完全甲基化現(xiàn)象。我們的前期研究結(jié)果也證實(shí)，LMP1和LMP2A在EBV陽性胃癌組織中表達(dá)不同，其中LMP1不表達(dá)，而LMP2A僅在部分標(biāo)本中表達(dá)[15]。FAHRAEUS等[16]采用免疫印跡法檢測(cè)到LMPs在約71%鼻咽癌組織(標(biāo)本來源中國(guó))中表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，2種EBV陽性腫瘤組織中LMP1和LMP2A編碼基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)有所不同，在EBV相關(guān)胃癌標(biāo)本所有的LMP1基因啟動(dòng)子和絕大部分(27/32)LMP2A編碼基因啟動(dòng)子呈高甲基化狀態(tài);而在鼻咽癌組織中，LMP1和LMP2A編碼基因的甲基化程度明顯下降，高甲基化率分別為45%和40%，表明EBV相關(guān)基因調(diào)控區(qū)域DNA甲基化狀態(tài)是基因表達(dá)的重要調(diào)節(jié)機(jī)制之一。BGS檢測(cè)結(jié)果所示的部分EBV陽性胃癌組織標(biāo)本中部分CpG位點(diǎn)U與M同時(shí)存在，我們推測(cè)其原因有兩種：一是等位基因甲基化情況不一致;二是病毒基因組DNA甲基化狀態(tài)不同(病毒部分DNA甲基化而另一部分DNA未甲基化)。
總之，EBV陽性胃癌及鼻咽癌組織中，EBV主要潛伏期編碼基因啟動(dòng)子區(qū)域CpG位點(diǎn)甲基化狀態(tài)與其表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，EBV基因的高甲基化狀態(tài)有助于其逃避免疫活性個(gè)體的免疫系統(tǒng)的監(jiān)視，并長(zhǎng)期存在宿主細(xì)胞內(nèi)，其在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中的具體作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。
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中考生：補(bǔ)習(xí)弱項(xiàng)是關(guān)鍵
專家建議，寒假中，要客觀地對(duì)期末考試試卷進(jìn)行分析，看看哪些題失了分，弄清失分原因。寒假學(xué)習(xí)中要多補(bǔ)習(xí)“瘸腿科目”，對(duì)薄弱環(huán)節(jié)進(jìn)行分析，哪科沒考好，冷靜分析原因，判斷該科是不是弱科。如果是，則要抓緊寒假時(shí)間，多補(bǔ)弱科基礎(chǔ)知識(shí)，避免中考時(shí)“瘸腿科目”拉分。另外假期既不要睡懶覺，也不要開夜車，要制定一個(gè)學(xué)習(xí)計(jì)劃，以保證每科的學(xué)習(xí)時(shí)間，每天至少進(jìn)行三科的復(fù)習(xí)，文理分開，擅長(zhǎng)、喜歡和厭惡的科目交叉進(jìn)行。記住，完成作業(yè)不是目的，根據(jù)作業(yè)查漏補(bǔ)缺，或翻書再?gòu)?fù)習(xí)一下薄弱環(huán)節(jié)才是根本。有解決不了的問題，千萬不要鉆“牛角尖”或置之不理，可以打電話請(qǐng)教一下老師或同學(xué)。
針對(duì)英語的復(fù)習(xí)，成績(jī)落后生要靜下心來，加強(qiáng)概念、單詞和公式的記憶，盡量多做歷年中考真題。在做完一套真題試卷后，要及時(shí)核對(duì)答案，看看哪些題目丟分，弄清丟分原因。通過做真題可了解中考命題范圍、題目深淺以及相關(guān)題型。同時(shí)，還要把做錯(cuò)的題記錄在錯(cuò)題集里，或用紅筆做上記號(hào)，便于下一次復(fù)習(xí)。通過有選擇性地做中考真題，可以體會(huì)和熟悉中考題型，同時(shí)對(duì)所學(xué)知識(shí)的“融會(huì)貫通”，使訓(xùn)練更有效。
高考生：鞏固提高是關(guān)鍵
高三學(xué)生對(duì)最后一個(gè)寒假應(yīng)該持何種態(tài)度，才能最大程度有利于備戰(zhàn)高考呢?寒假是高三生自我調(diào)整、鞏固提高的關(guān)鍵時(shí)期。寒假里，考生的學(xué)習(xí)將由在校時(shí)的被動(dòng)學(xué)習(xí)變?yōu)橥耆恐鲃?dòng)學(xué)習(xí)。因此，考生要制訂一套合適的學(xué)習(xí)計(jì)劃和假期作息時(shí)間表，做到復(fù)習(xí)有計(jì)劃，生活有規(guī)律。假期復(fù)習(xí)計(jì)劃一方面包括學(xué)習(xí)知識(shí)內(nèi)容的計(jì)劃，;另一方面還包括整個(gè)假期的時(shí)間安排。以往，很多考生放假后早上不吃飯，睡懶覺，盡情地放松，平時(shí)的生物鐘完全被打亂。開學(xué)后，這些考生很難適應(yīng)正常的作息時(shí)間，從而直接影響了新學(xué)期的復(fù)習(xí)狀態(tài)。專家認(rèn)為，高三生在制訂一份詳細(xì)的作息時(shí)間表時(shí)，要把每天的學(xué)習(xí)任務(wù)、時(shí)間具體化。高三生寒假里要保持正常的作息時(shí)間，每天上午學(xué)習(xí)3個(gè)半小時(shí)，下午學(xué)習(xí)兩個(gè)半小時(shí)。另外，每天還要堅(jiān)持看半小時(shí)的新聞時(shí)事(電視或報(bào)紙)，并留出半小時(shí)的體育鍛煉時(shí)間。
家長(zhǎng)：要保證孩子張弛有度
寒假期間，學(xué)生和家長(zhǎng)相處的時(shí)間多了起來。一些老師建議，假期中高考生的家長(zhǎng)別忘幫助孩子制定明確學(xué)習(xí)目標(biāo)，督促孩子進(jìn)行體育鍛煉。
新思路的專家提醒家長(zhǎng)，家長(zhǎng)要督促孩子完成好老師布置的作業(yè)，根據(jù)實(shí)際情況選擇一些家教、輔導(dǎo)班，但要注意不要把孩子的假期安排得過于緊張，要給孩子一個(gè)張弛有度的假期。這個(gè)寒假，高三和初三的學(xué)生進(jìn)入了“休整期”，不論平時(shí)成績(jī)?nèi)绾?，高三和初三的每一個(gè)學(xué)生都有潛力。為什么有相當(dāng)多的學(xué)生的潛力沒有發(fā)揮出來?一個(gè)最主要的原因是心理素質(zhì)不高。有的學(xué)生平時(shí)成績(jī)很不錯(cuò)，但是一旦某次測(cè)驗(yàn)成績(jī)不理想就一籌莫展，甚至想休學(xué)、退學(xué)、降級(jí)，家長(zhǎng)和老師的規(guī)勸無濟(jì)于事。也有的高三學(xué)生，為了迎接高考，家長(zhǎng)硬逼著學(xué)習(xí)，晚上學(xué)到12點(diǎn)，早晨4點(diǎn)就起床，但仍沒能考上理想的大學(xué)。家長(zhǎng)認(rèn)為只要學(xué)習(xí)時(shí)間長(zhǎng)效果就會(huì)明顯，殊不知這樣卻違背了大腦的運(yùn)轉(zhuǎn)規(guī)律。
一、加強(qiáng)教學(xué)管理，規(guī)范教學(xué)行為
1、嚴(yán)格崗位職責(zé)，加強(qiáng)教學(xué)常規(guī)檢查。根據(jù)《肥城市初中學(xué)校教學(xué)管理規(guī)范和實(shí)施細(xì)則》，嚴(yán)格教學(xué)崗位、教學(xué)環(huán)節(jié)的檢查巡視，杜絕隨意空課、調(diào)課、占課、拖課現(xiàn)象，保證教學(xué)各項(xiàng)工作科學(xué)、規(guī)范運(yùn)轉(zhuǎn)。
2、科學(xué)制定計(jì)劃，精心安排復(fù)習(xí)。要督促?gòu)V大教師根據(jù)教學(xué)進(jìn)度，及時(shí)結(jié)束新課，科學(xué)安排復(fù)習(xí)。學(xué)校要對(duì)各個(gè)學(xué)科、各位教師的復(fù)習(xí)計(jì)劃進(jìn)行督查，強(qiáng)化復(fù)習(xí)期間的教學(xué)秩序管理，切實(shí)杜絕隨意性、放鴨式復(fù)習(xí)，確保復(fù)習(xí)的目的性、針對(duì)性、有效性，提高復(fù)習(xí)效益。
二、優(yōu)化教學(xué)策略，提高教學(xué)效益
3、上好復(fù)習(xí)課，努力提高課堂效益。要重視復(fù)習(xí)課教學(xué)策略的研究，加強(qiáng)對(duì)復(fù)習(xí)課教學(xué)目標(biāo)、教學(xué)重點(diǎn)、教學(xué)方法、實(shí)施策略等具體問題的研討，努力通過凝聚集體智慧，構(gòu)建自主高效的復(fù)習(xí)課教學(xué)操作模式，強(qiáng)化知識(shí)的聯(lián)系，促進(jìn)知識(shí)的遷移，實(shí)現(xiàn)能力的提升，充分激發(fā)學(xué)生的潛能，激活學(xué)生的思維，提高課堂45分鐘的質(zhì)量效益。
4、嚴(yán)禁題海戰(zhàn)術(shù)，精細(xì)教學(xué)質(zhì)量監(jiān)控。要堅(jiān)決摒棄靠題海戰(zhàn)術(shù)、機(jī)械重復(fù)式作業(yè)提高質(zhì)量的做法，努力優(yōu)化提升習(xí)題、試題及作業(yè)水平，提高單位時(shí)間效益。各學(xué)校、各學(xué)科要把習(xí)題、試題和作業(yè)研究作為一個(gè)重要的課題，聚力聚智，常思常探，切實(shí)優(yōu)化題目設(shè)計(jì)，精心作業(yè)布置，及時(shí)測(cè)試講評(píng)，保證做到精練精批，反饋高效。
三、減輕學(xué)生負(fù)擔(dān)，促進(jìn)身心兩健
5、加強(qiáng)作業(yè)研究，嚴(yán)格控制作業(yè)量。各單位要認(rèn)真執(zhí)行省規(guī)40條，嚴(yán)格控制作業(yè)量，保證學(xué)生充足的睡眠時(shí)間，杜絕超時(shí)超量布置校內(nèi)作業(yè)和家庭作業(yè)，杜絕過量使用成套的單元試卷，杜絕盲目使用教輔資料，確實(shí)把作業(yè)的數(shù)量降下來，把作業(yè)的實(shí)效提上來。因作業(yè)量的問題引發(fā)社會(huì)及家長(zhǎng)不滿造成不良影響的，將追究學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)及相關(guān)教師的責(zé)任。
6、加強(qiáng)生活指導(dǎo)，力促學(xué)生和諧發(fā)展。廣大教師既要關(guān)注學(xué)生的學(xué)習(xí)狀況，更加關(guān)注學(xué)生的身心健康。因此，要重視并加強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)指導(dǎo)研究，引導(dǎo)學(xué)生科學(xué)合理地安排作息時(shí)間、調(diào)節(jié)心理，做到勞逸結(jié)合，身心兩健，以良好的狀態(tài)迎接期末考試。
四、科學(xué)統(tǒng)籌安排，部署好考試和放假工作
7、加強(qiáng)考風(fēng)建設(shè)，發(fā)揮考試效能。各單位要利用主題班會(huì)，加強(qiáng)考風(fēng)考紀(jì)建設(shè)，教育學(xué)生誠(chéng)信考試。要充分發(fā)揮考試的診斷、激勵(lì)和發(fā)展功能，認(rèn)真評(píng)卷，做好成績(jī)統(tǒng)計(jì)和質(zhì)量分析，指導(dǎo)教師寫好試題評(píng)價(jià)報(bào)告，在放假前做好試卷的講評(píng)和修改完善。
一、科學(xué)合理地制定暑假活動(dòng)計(jì)劃
假期中任務(wù)繁多，想做的事情也很多。要把這些事情逐一篩選、調(diào)整，根據(jù)暑期時(shí)間合理安排，制定一份“暑假活動(dòng)表”。一切活動(dòng)應(yīng)該嚴(yán)格按照“計(jì)劃表”進(jìn)行，但還是要注意勞逸結(jié)合。
二、認(rèn)真復(fù)習(xí)，迎接獎(jiǎng)學(xué)金考試
這個(gè)測(cè)試是暑假后初一下學(xué)期的一個(gè)總結(jié)，暑假中，要把初一下學(xué)期學(xué)習(xí)的所有內(nèi)容認(rèn)真復(fù)習(xí)一遍，還要制定一個(gè)“復(fù)習(xí)計(jì)劃表”。爭(zhēng)取測(cè)出好成績(jī)。
三、培養(yǎng)自己的興趣愛好，發(fā)展自己的特長(zhǎng)
根據(jù)自己的興趣愛好，積極參加學(xué)校組織的各種興趣小組，如：繪畫、書法、音樂、英語、信息技術(shù)，掌握一技之長(zhǎng)，為將來的發(fā)展打下基礎(chǔ)。
四、勤奮讀書，注意積累，善于寫作，靈活運(yùn)用
【關(guān)鍵詞】SO2;標(biāo)準(zhǔn)溶液;溫度控制
測(cè)定環(huán)境空氣中的SO2，一般采用HJ 482-2009《環(huán)境空氣 二氧化硫的測(cè)定 甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》，該法主要測(cè)試原理是環(huán)境空氣中的SO2通過采集器被甲醛緩沖溶液吸收后，生成穩(wěn)定的羥基甲磺酸加成化合物，在樣品中加入氫氧化鈉溶液使加成化合物分解，釋放出的SO2與鹽酸副玫瑰苯胺作用，生成紫紅色化合物，根據(jù)顏色深淺，用分光光度法測(cè)定。相比其他分析方法，甲醛法所用試劑無劇毒，價(jià)廉易得；對(duì)低濃度二氧化硫采樣吸收率高；標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液穩(wěn)定性好，即使在室溫條件下也可長(zhǎng)時(shí)間保持不易降解損失；采樣吸收液的最佳溫度范圍寬比汞法易于控制等特點(diǎn)。缺點(diǎn)是：采樣和分析技術(shù)雖然易于掌握，但是具體操作繁瑣，對(duì)監(jiān)測(cè)人員素質(zhì)要求高。當(dāng)前二氧化硫測(cè)定頻繁，以建設(shè)項(xiàng)目環(huán)境現(xiàn)狀監(jiān)測(cè)為例，一個(gè)空氣監(jiān)測(cè)點(diǎn)位每天需測(cè)定一個(gè)日均值和四個(gè)小時(shí)值，如果監(jiān)測(cè)點(diǎn)位較多，加上測(cè)定過程繁瑣，監(jiān)測(cè)人員難免會(huì)在實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)紕漏，影響分析結(jié)果。
《環(huán)境空氣二氧化硫的測(cè)定甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》（HJ 482-2009）對(duì)采樣和實(shí)驗(yàn)室分析的各個(gè)流程做出了詳細(xì)的規(guī)定，并且放寬了校準(zhǔn)曲線斜率的要求，相比《環(huán)境空氣 二氧化硫的測(cè)定 甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》（GB/T 15262-94）難度有所降低，但是在實(shí)際操作中，對(duì)監(jiān)測(cè)人員仍有較大難度，還有很多需要注意的地方，經(jīng)長(zhǎng)期開展實(shí)驗(yàn)工作證明，采取一定的措施，可以有效降低實(shí)驗(yàn)難度，提高數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
1、外購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)溶液降低實(shí)驗(yàn)難度
制備二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，需要對(duì)亞硫酸鈉溶液進(jìn)行標(biāo)定，然后計(jì)算二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的質(zhì)量濃度，整個(gè)標(biāo)定過程十分重要，是關(guān)系到測(cè)定數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟。標(biāo)定過程需要對(duì)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和亞硫酸鈉溶液進(jìn)行標(biāo)定，其操作過程和計(jì)算公式都較為復(fù)雜。我們由于人員缺乏和實(shí)驗(yàn)頻率加大等原因，經(jīng)過過成本核算，逐步開始采用環(huán)境保護(hù)部標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所生產(chǎn)的二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行試驗(yàn)，用手工配制標(biāo)準(zhǔn)溶液和外購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)溶液做出的校準(zhǔn)曲線進(jìn)行比對(duì)，兩種溶液各做校準(zhǔn)曲線20條，其中A0和a值都滿足要求，外購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制校準(zhǔn)曲線斜率在0.044±0.002范圍內(nèi)，手工配制標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制校準(zhǔn)曲線斜率18條在0.044±0.002范圍內(nèi)，另外兩條在0.040~0.042范圍內(nèi)，全部40條校準(zhǔn)曲線都滿足HJ 482-2009標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的要求。由于標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為100μg/mL可保存一年，濃度為10μg/mL可保存3個(gè)月，濃度為1μg/mL僅可保存1個(gè)月，可見高濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液更利于保存。同時(shí)，也應(yīng)采購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)密碼樣品做為質(zhì)控樣品，對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行質(zhì)量控制，進(jìn)一步提高監(jiān)測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率。因此，采用外購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)溶液開展實(shí)驗(yàn)，可以減少很多繁雜操作，并能得到很好的實(shí)驗(yàn)效果。
2、嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間。
《環(huán)境空氣 二氧化硫的測(cè)定甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》（HJ 482-2009）表2中對(duì)顯色溫度和顯色做出了相應(yīng)的規(guī)定，魏卓立、曹威等人通過實(shí)驗(yàn)表明在18℃下，顯色7分鐘時(shí)，顯色反應(yīng)已進(jìn)行完全，即可進(jìn)行比色。但是通過實(shí)際工作中，發(fā)現(xiàn)在繪制校準(zhǔn)曲線的時(shí)候，如果顯色時(shí)間不充分，高濃度二氧化硫試樣測(cè)得吸光值偏低，特別在低溫度條件下，會(huì)影響到整個(gè)校準(zhǔn)曲線的斜率值。因此建議在繪制校準(zhǔn)曲線和測(cè)定高濃度樣品的時(shí)候，應(yīng)嚴(yán)格按照要求，給足顯色反應(yīng)的時(shí)間。同時(shí)，由于顯色溫度30℃的時(shí)候穩(wěn)定時(shí)間僅為10分鐘，因此在測(cè)試樣品較多的情況下，有條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該配備空調(diào)控制室溫，沒條件的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格控制水浴鍋溫度，使顯色溫度和室溫保持3℃之內(nèi)的差距。在室溫較高情況下，若測(cè)定樣品較多，須分批次檢測(cè)，嚴(yán)格控制比色用時(shí)，以免影響測(cè)定結(jié)果。
3、玻璃儀器的清洗
實(shí)驗(yàn)生成的紫紅色化合物不易清洗，在洗滌比色管的時(shí)候應(yīng)認(rèn)真仔細(xì)，避免PRA溶液殘留，可以采用溫水洗滌，加速顯色反應(yīng)，以顏色判定是否有殘留試劑，同時(shí)還應(yīng)避免用硫酸-鉻酸洗液洗滌玻璃器皿，以免產(chǎn)生負(fù)干擾。由于因樣品中SO2的含量差別較大，每次在測(cè)定時(shí)，都需認(rèn)真清洗專用比色皿，使用前必須用蒸餾水和待測(cè)溶液對(duì)其進(jìn)行認(rèn)真清洗，以免樣品之間產(chǎn)生干擾。
4、結(jié)論
（1）鑒于二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液標(biāo)定過程非常繁瑣，可外購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制校準(zhǔn)曲線，大幅度簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟，配合外購(gòu)密碼樣品，提高測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確度。
（2）溫度控制是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵條件之一，應(yīng)當(dāng)十分注意。應(yīng)嚴(yán)格按照相關(guān)要求開展實(shí)驗(yàn)。
（3）實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的紫紅色化合物應(yīng)及時(shí)清洗，以免產(chǎn)生干擾。
參考文獻(xiàn)
此外，在新學(xué)期開學(xué)之前，要好好的梳理一下上個(gè)學(xué)期學(xué)習(xí)的東西，為學(xué)習(xí)新知識(shí)做好準(zhǔn)備。當(dāng)然能夠提前預(yù)習(xí)一下新學(xué)期的內(nèi)容更好，但如果時(shí)間不充裕，復(fù)習(xí)比預(yù)習(xí)更重要。因?yàn)楫吘剐聝?nèi)容老師會(huì)在課堂上講，而上個(gè)學(xué)期的東西，可能要一直等到畢業(yè)總復(fù)習(xí)的時(shí)候才會(huì)再講了。
接下來提分君為大家詳細(xì)介紹一下要如何安排寒假的學(xué)習(xí)計(jì)劃：
進(jìn)行分析與定向，攻克薄弱環(huán)節(jié)
寒假畢竟不長(zhǎng)，目標(biāo)不宜太大、復(fù)習(xí)范圍不宜太廣。如果想真正有收獲，一定不要貪多喲！適宜重點(diǎn)攻克薄弱學(xué)科、或某學(xué)科中的重點(diǎn)內(nèi)容。重點(diǎn)夯實(shí)基礎(chǔ)知識(shí)，查漏補(bǔ)缺，為考試打好堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)！
在制定寒假?gòu)?fù)習(xí)計(jì)劃之前要科學(xué)、準(zhǔn)確地自我解剖、自我分析這一學(xué)年的學(xué)習(xí)狀態(tài)即考試成績(jī)，包括平時(shí)系列測(cè)試、期中考試成績(jī)、期末考試成績(jī)，其中以期末考試成績(jī)?yōu)橹?，因?yàn)槠谀┛荚嚨男哦缺容^高。
自我分析的目標(biāo)包括兩個(gè)方面，一是定位，二是定向。所謂定位，就是說期末考試后，全區(qū)有一個(gè)成績(jī)統(tǒng)計(jì)，每個(gè)學(xué)生都可以知道自己總分的位置，你處在一個(gè)什么位置上?心里要十分清楚，這基本反映了你的實(shí)力。所謂定向，就是說你的優(yōu)勢(shì)學(xué)科是什么?你的弱勢(shì)學(xué)科是什么?薄弱環(huán)節(jié)在哪兒?優(yōu)勢(shì)學(xué)科的優(yōu)勢(shì)原因是什么?
具體建議：沒有舍棄就沒收獲!基礎(chǔ)薄弱考生要記住：弱就弱在基礎(chǔ)上!所以寒假的學(xué)習(xí)要抓基礎(chǔ)知識(shí)、基本技能、基本方法。要抓非智力因素、信心、目標(biāo)、意志、毅力、方法、心態(tài)。要多練，特別是中低檔試題，要看、要想更要練。
合理規(guī)劃時(shí)間，制定學(xué)習(xí)計(jì)劃
放假后的第一件事，應(yīng)該是整理出可利用的時(shí)間，做出時(shí)間安排表，以每一天為單位；接下來梳理自身學(xué)習(xí)情況，找出最需要提高或最想做的事，合理分配復(fù)習(xí)和預(yù)習(xí)時(shí)間，有針對(duì)性地制定假期學(xué)習(xí)計(jì)劃。
每天有效學(xué)習(xí)時(shí)間最好保持在5-6個(gè)小時(shí)。可以根據(jù)自己的情況合理的規(guī)劃一下，例如：早上2個(gè)半小時(shí)，中午2個(gè)半小時(shí)，晚上1個(gè)小時(shí)。學(xué)習(xí)時(shí)間最好固定在：上午8：30-11：30，下午14：30-17：30；晚上19：30-21：30。習(xí)慣比聰明更重要！只要你按照計(jì)劃來，每天堅(jiān)持，你的成績(jī)不會(huì)沒有進(jìn)步的！相信你的假期一定會(huì)有意想不到的收獲。下面是幾個(gè)小Tips，供大家參考：
1、早晨合理安排30分鐘讀一讀英語
2、利用上午2節(jié)課的時(shí)間分別獨(dú)立完成2科寒假作業(yè)
3、中午適當(dāng)午休，既不要睡懶覺，也不要開夜車。
4、和上午一樣，利用下午的時(shí)間做些寒假作業(yè)，但不可一下子貪多。要均衡、科學(xué)安排。
5、自由時(shí)間可以干一些喜歡的事情，但要控制在半小時(shí)的時(shí)間里。
6、晚飯之前是自由活動(dòng)的時(shí)間，可以看電視等，但要看看新聞。
7、讀一些好的小文章，寫日記或是讀后感，或是精彩的摘抄
8、制定學(xué)習(xí)計(jì)劃，主要是以保證每科的學(xué)習(xí)時(shí)間為主。若在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)無法完成作業(yè)，應(yīng)趕快根據(jù)計(jì)劃更換到其他的學(xué)習(xí)科目。千萬不要總出現(xiàn)計(jì)劃總是趕不上變化的局面。
9、晚上學(xué)習(xí)的最后一個(gè)小時(shí)為機(jī)動(dòng)，目的是把白天沒有解決的問題或沒有完成的任務(wù)再找補(bǔ)一下。
10、每天至少進(jìn)行三科的復(fù)習(xí)，文理分開，擅長(zhǎng)/喜歡和厭惡的科目交叉進(jìn)行。不要前趕或后補(bǔ)作業(yè)。完成作業(yè)不是目的，根據(jù)作業(yè)查缺補(bǔ)漏，或翻書再?gòu)?fù)習(xí)一下薄弱環(huán)節(jié)才是根本。
11、一定要預(yù)留出鍛煉身體和休閑活動(dòng)的時(shí)間。
大家上午好！今天，我演講的題目是《期末考試，你準(zhǔn)備好了嗎？》時(shí)光荏苒，不經(jīng)意間，五個(gè)月的時(shí)間轉(zhuǎn)瞬即逝，本學(xué)期已經(jīng)接近尾聲，同學(xué)們馬上就要迎來本學(xué)期的期末考試，相信同學(xué)們此時(shí)內(nèi)心情緒會(huì)比較復(fù)雜。想到父母和老師殷切期望的眼神、想到同學(xué)們拼搏競(jìng)爭(zhēng)的氣勢(shì)，同學(xué)們內(nèi)心可能會(huì)有一些緊張；想到展現(xiàn)自我、驗(yàn)證自我的時(shí)刻即將到來，同學(xué)們可能會(huì)有一些興奮；想到期末考試后那美好的假期，同學(xué)們可能也會(huì)有一些期待。期末考試的戰(zhàn)鼓已經(jīng)敲響，考驗(yàn)我們的時(shí)刻即將來臨。同學(xué)們，你們準(zhǔn)備好迎接挑戰(zhàn)了嗎？在此，我想對(duì)同學(xué)們提出以下幾點(diǎn)建議。
一、端正態(tài)度，正確認(rèn)識(shí)期末考試同學(xué)們要首先意識(shí)到，期末考試是對(duì)本學(xué)期學(xué)習(xí)情況的總結(jié)和檢驗(yàn)，通過考試，使每位同學(xué)發(fā)現(xiàn)自己的學(xué)習(xí)態(tài)度、知識(shí)、方法等方面存在的問題，以便在下學(xué)期的學(xué)習(xí)中做出相應(yīng)的調(diào)整，采取相應(yīng)對(duì)策。另外，期末考試是對(duì)我們一種磨煉，考試，是每個(gè)學(xué)生必經(jīng)之旅，在這個(gè)過程中，我們的意志在磨練和忍耐中變得堅(jiān)強(qiáng)，我們的思想在經(jīng)歷和壓力中走向成熟。因此，期末考試是促進(jìn)我們成長(zhǎng)、進(jìn)步的重要階梯，我們要將期末考試看做鍛煉自己、考驗(yàn)自己的好機(jī)會(huì)，要以一種平和的心態(tài)應(yīng)對(duì)期末考試。
二、制定計(jì)劃，有側(cè)重地復(fù)習(xí)《禮記》言：“凡事預(yù)則立，不預(yù)則廢?！笔侵覆徽撟鍪裁词?，事先有計(jì)劃有準(zhǔn)備，就更容易獲得成功。高中課程繁雜，考試科目眾多，尤其是期末考試，往往是對(duì)一整個(gè)學(xué)期學(xué)習(xí)效果的考察，考察范圍廣知識(shí)多。同學(xué)們首先要緊跟老師步伐，按照老師的要求和計(jì)劃有序復(fù)習(xí)，這樣才能抓住復(fù)習(xí)重點(diǎn)，不至于在茫茫學(xué)海中迷失方向。另外，由于個(gè)體差異的存在，每個(gè)同學(xué)也需要給自己量身打造一個(gè)個(gè)人學(xué)習(xí)計(jì)劃。仔細(xì)分析自己的優(yōu)勢(shì)學(xué)科是什么，薄弱學(xué)科是什么，尤其要針對(duì)薄弱學(xué)科制定出背誦、做題等復(fù)習(xí)計(jì)劃。計(jì)劃要制定得合理，要有可行性，當(dāng)然，更重要的是要嚴(yán)格按照計(jì)劃復(fù)習(xí)，要將計(jì)劃落到實(shí)處，絕不能做“思想的巨人，行動(dòng)的矮子”。高中生活固然緊張，而有心人總能擠出瑣碎時(shí)間加以利用，長(zhǎng)期堅(jiān)持，必有成效。“騏驥一躍，不能十步；駑馬十駕，功在不舍?！卑凑沼?jì)劃穩(wěn)扎穩(wěn)打，敢于下苦功夫、笨功夫的人，方能有所收獲。
三、科學(xué)復(fù)習(xí)，事半功倍科學(xué)有效的方法，可以讓我們的復(fù)習(xí)、應(yīng)考事半功倍。古人云：“取法乎上，僅得其中；取法乎中，只得其下?！敝v的就是做任何事情都要講究科學(xué)有效的方法。首先，要重視基礎(chǔ)、不犯概念性錯(cuò)誤。教材中的基礎(chǔ)知識(shí)最具有生命力，只有夯實(shí)基礎(chǔ)，我們才可能用有限的定義、定理、公式去應(yīng)對(duì)無限變化的能力測(cè)試。其次，要重視糾錯(cuò)、不犯重復(fù)性錯(cuò)誤。復(fù)習(xí)、檢查的關(guān)鍵就是要糾錯(cuò)，我們要抓住錯(cuò)誤、理清錯(cuò)誤，確保不犯同類錯(cuò)誤。再次，要重視規(guī)范、養(yǎng)成規(guī)范答題的習(xí)慣。“習(xí)慣決定性格，性格決定命運(yùn)。”平時(shí)練習(xí)就要養(yǎng)成步驟清晰、要點(diǎn)全面、書寫美觀的答題習(xí)慣，考場(chǎng)上才能有效答題。