摘要：法尼基焦磷酸合酶(FPS)是異戊二烯生物合成途徑中的一個關(guān)鍵酶。為探究FPS在暗紫貝母生物堿合成代謝過程中的作用,本研究利用RT-PCR和RACE技術(shù),克隆了暗紫貝母法基尼焦磷酸合酶基因的全長cDNA序列,命名為FrFPS,GenBank登錄號為KX 900485。該序列全長1333 bp,具有長度為1059 bp的完整開放閱讀框,編碼352個氨基酸,預(yù)測分子量40.13 kDa,等電點pH值為5.17。FrFPS基因的推導氨基酸序列含有高等植物FPS蛋白的典型保守結(jié)構(gòu)域,亞細胞定位預(yù)測其在細胞質(zhì)、線粒體基質(zhì)空間及微體上。系統(tǒng)進化分析顯示,暗紫貝母與鐵炮百合處于同一分支,其親緣關(guān)系最近。實時熒光定量PCR分析結(jié)果表明,FrFPS主要在鱗莖表達,且表達量隨海拔梯度升高而降低,而在莖、葉中表達量很低。HPLC測定暗紫貝母鱗莖中生物堿含量,發(fā)現(xiàn)隨海拔梯度升高生物堿含量降低。研究認為,FrFPS基因響應(yīng)了對不同海拔梯度的應(yīng)答。
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