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利用gusA基因在水稻組織中示蹤和定量水稻白葉枯病菌的方法

摘要:水稻白葉枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)從自然孔口水孔或者傷口處侵入水稻葉片,在維管束中定殖、繁殖和擴展,引起典型的葉枯癥狀??梢暬@個動態(tài)的病程過程和快速定量水稻組織中細菌的群體是Xoo-水稻互作研究中亟待突破的技術(shù)難點。本研究在PXO99A菌株中表達gusA基因,將其置于lacZ啟動子、hrpX啟動子和不含有(T1)4終止子的hrpX啟動子下,構(gòu)建了3個示蹤菌株P(guān)XO99A AGUSRBS、PXO99GUSA X和PXO99GUSX-。水稻上毒性測定結(jié)果顯示,這3個示蹤菌株與野生型PXO99A展現(xiàn)相同的毒性。利用示蹤菌株,通過注射接種法,能夠觀察到Xoo在水稻維管束中定殖和擴展的動態(tài)變化;通過噴霧接種法,能夠觀察到Xoo從葉尖或者葉緣侵入水稻葉片引起發(fā)病的特性;發(fā)現(xiàn)PXO99GUSA X和PXO99A AGUSX-比PXO99GUSA RBS能夠更加靈敏地反映這些病程。同時發(fā)現(xiàn),PXO99GUSARBS的細菌數(shù)量與受其侵染的水稻組織的GUS活性顯著正相關(guān)。本研究也評價了利用GUS活性測定法精確和快速地定量水稻組織中細菌群體的可行性。以上結(jié)果表明這套GUS系統(tǒng)是非常有效的,能夠示蹤病原菌的侵染過程和監(jiān)測細菌在水稻組織中的群體數(shù)量,這將為Xoo-水稻互作研究提供有力的技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞:
  • 水稻白葉枯病菌  
  • 病程  
  • gusa基因  
  • gus活性  
作者:
李瑜; 李逸朗; 張翠萍; 陳濤; 羅鈴滈; 李映斌; 陳功友; 羅坤; 鄒麗芳
單位:
上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院; 上海200240; 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院; 長沙410128
刊名:
植物病理學(xué)報

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期刊名稱:植物病理學(xué)報

植物病理學(xué)報緊跟學(xué)術(shù)前沿,緊貼讀者,國內(nèi)刊號為:11-2184/S。堅持指導(dǎo)性與實用性相結(jié)合的原則,創(chuàng)辦于1955年,雜志在全國同類期刊中發(fā)行數(shù)量名列前茅。