摘要:目的探討上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院分離的5株泛耐藥陰溝腸桿菌產(chǎn)碳青霉烯酶及16SrRNA甲皋化酶的情況及兩者之間的相關(guān)性。方法用Etest法檢測5株泛耐藥陰溝腸桿菌對10種抗菌藥物的MIC值。PCR擴(kuò)增16SrRNA甲基化酶基因armA、mtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA,β-內(nèi)酰胺酶基因TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、CTX-M-25、PER-1、VEB-1。鳥槍克隆法克隆碳青霉烯酶基因,并對克隆片段進(jìn)行測序。質(zhì)粒接合試驗驗證碳青霉烯酶基因及16SrRNA甲基化酶基因是否具有轉(zhuǎn)移性。脈沖場凝膠電泳(PFGE)法對5株菌進(jìn)行分子分型。等電聚焦電泳法檢測β-內(nèi)酰胺酶等電點。Southern雜交法對耐藥決定因子進(jìn)行定位。結(jié)果5株陰溝腸桿菌對10種抗菌藥物的MIC值均〉32mg/L。克隆的碳青霉稀酶基因為bla。。,酶編碼基因上游為一轉(zhuǎn)座酶基因,兩側(cè)為復(fù)制靶位,下游為Is蜘桶的插入序列,該序列包括一個重復(fù)序列和tnpA轉(zhuǎn)座子,酶編碼基因位于54.2kb的一個非接合性大質(zhì)粒上。等電聚焦電泳顯示5株菌均產(chǎn)4種β-內(nèi)酰胺酶(TEM-1,p15.4;KPC-2,p16.7;SttV-12,p18.2;CTX-M-14,p18.4)。16SrRNA甲基化酶基因位于接合性質(zhì)粒上,而blakpc-2基因則位于非接合性質(zhì)粒上,5株菌PFGE型別一致。結(jié)論5株泛耐藥陰溝腸桿菌對碳青霉烯類耐藥由產(chǎn)碳青霉烯酶KPC-2所介導(dǎo)。blakpc-2與armA型16SrRNA甲基化酶基因由兩條不同的質(zhì)粒編碼,不存在相關(guān)性。臨床醫(yī)院應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)控,以防止交叉感染。
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