摘要：目的探索聚己內(nèi)酯/明膠納米纖維復(fù)合膜在構(gòu)建組織工程化視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)中的應(yīng)用前景。方法采用自發(fā)分化法將人胚胎干細(xì)胞(ESC)誘導(dǎo)為視網(wǎng)膜色素上皮(ESC-RPE)細(xì)胞,并通過流式細(xì)胞術(shù)檢測ESC-RPE細(xì)胞特定細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)情況;采用靜電紡絲法制備聚己內(nèi)酯(PCL)納米纖維膜和PCL/明膠納米纖維復(fù)合膜,掃描電子顯微鏡下觀察2種納米纖維膜的表面形貌,并測定2種支架的接觸角;利用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8(CCK-8)法檢測2種納米纖維膜浸提液對ESC-RPE細(xì)胞活力的影響;將ESC-RPE細(xì)胞培養(yǎng)在PCL/明膠納米纖維復(fù)合膜上,通過免疫熒光法檢測組織工程化RPE特異性標(biāo)志物的表達(dá)。結(jié)果ESC-RPE細(xì)胞不表達(dá)多能性標(biāo)志物OCT4,陽性表達(dá)RPE特異性標(biāo)志物小眼畸形相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)、RPE65和Bestrophin。PCL納米纖維膜和PCL/明膠納米纖維復(fù)合膜均呈纖維多孔狀,2種支架的接觸角分別為(97.2±3.1)°和(13.6±2.4)°,2種支架的浸提液對ESC-RPE細(xì)胞的生長均無顯著影響。培養(yǎng)在PCL/明膠納米纖維復(fù)合膜上的ESC-RPE細(xì)胞陽性表達(dá)特異性標(biāo)志物MITF和ZO-1。結(jié)論P(yáng)CL/明膠納米纖維復(fù)合膜具有良好的親水性和生物相容性,并且可支持ESC-RPE細(xì)胞的生長,有望應(yīng)用于組織工程化RPE的構(gòu)建。
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