摘要:目的觀察人臍帶問充質干細胞(UCMSC)向汗腺細胞(SGC)分化的能力以及細胞外信號調節(jié)激酶(ERK)信號通路在分化過程中的作用。方法(1)體外分離培養(yǎng)UCMSC和SGC,通過檢測CD14、CD29、CD34、CD44、CD45、CD105、細胞角蛋白7(CK7)、CK19、癌胚抗原(CEA)表達情況鑒定UCMSC,檢測CK19、CEA表達情況鑒定SGC。(2)制作熱損傷SGC模型,按隨機數字表法將鋪于Transwell培養(yǎng)板下層的UCMSC分為4組,均用汗腺培養(yǎng)液培養(yǎng):對照組,培養(yǎng)液中不添加刺激因素;熱損傷組,將熱損傷SGC(每孔1×10^4個)接種于Transwell培養(yǎng)板小室與UCMSC間接共培養(yǎng);熱損傷+EGF組.在熱損傷組處理條件基礎上,培養(yǎng)液中添加50ng/mLEGF;熱損傷+PD98059組,在熱損傷組處理條件基礎上,培養(yǎng)液中添加10nmol/mL ERK信號通路特異性抑制劑PD98059。1周后,流式細胞儀檢測各組UCMSC中CK7、CK19表達率,免疫組織化學法檢測CK19、CEA表達情況并計算CEA表達牢,蛋白質印跡法檢測磷酸化ERK(pERK)表達水平。對數據行多組間單因素方差分析。結果(1)UCMSC高表達CD29、CD44、CD105,少揎表達或不表達CD14、CD34、CD45、CK7、CK19、CEA;SGC中CEA和CK19均呈陽性表達,證實獲得的2種細胞均為純化細胞。(2)誘導培養(yǎng)1周后,熱損傷組與熱損傷+EGF組UCMSC巾CK7、CK19、CEA陽性表達率及pERK表達水平分別為(6.4±0.7)%、(5.7±0.3)%、(7.4±1.0)70、0.790±0.049與(14.3±1.0)%、(12.6±1.1)%、(17.6±2.3)%、1.200±0.032,均顯著高于對照組的(2.2±1.5)%、(2.2±0.7)%、(3.3±0.7)%、0.640±0.026,F值分別為78.49、139.36、87.13、191.74,P值均小于0.01;熱損傷+EGF組UCMSC各指標水平照著高于熱損傷組(F值為50.14~145.47,P值均小于0.01);熱損傷+PD98059組與對照組UCMSC各指標水平相
注:因版權方要求,不能公開全文,如需全文,請咨詢雜志社
熱門期刊
中國體外循環(huán)