摘要:目的觀察人臍帶問充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSC)向汗腺細(xì)胞(SGC)分化的能力以及細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)信號(hào)通路在分化過程中的作用。方法(1)體外分離培養(yǎng)UCMSC和SGC,通過檢測CD14、CD29、CD34、CD44、CD45、CD105、細(xì)胞角蛋白7(CK7)、CK19、癌胚抗原(CEA)表達(dá)情況鑒定UCMSC,檢測CK19、CEA表達(dá)情況鑒定SGC。(2)制作熱損傷SGC模型,按隨機(jī)數(shù)字表法將鋪于Transwell培養(yǎng)板下層的UCMSC分為4組,均用汗腺培養(yǎng)液培養(yǎng):對(duì)照組,培養(yǎng)液中不添加刺激因素;熱損傷組,將熱損傷SGC(每孔1×10^4個(gè))接種于Transwell培養(yǎng)板小室與UCMSC間接共培養(yǎng);熱損傷+EGF組.在熱損傷組處理?xiàng)l件基礎(chǔ)上,培養(yǎng)液中添加50ng/mLEGF;熱損傷+PD98059組,在熱損傷組處理?xiàng)l件基礎(chǔ)上,培養(yǎng)液中添加10nmol/mL ERK信號(hào)通路特異性抑制劑PD98059。1周后,流式細(xì)胞儀檢測各組UCMSC中CK7、CK19表達(dá)率,免疫組織化學(xué)法檢測CK19、CEA表達(dá)情況并計(jì)算CEA表達(dá)牢,蛋白質(zhì)印跡法檢測磷酸化ERK(pERK)表達(dá)水平。對(duì)數(shù)據(jù)行多組間單因素方差分析。結(jié)果(1)UCMSC高表達(dá)CD29、CD44、CD105,少揎表達(dá)或不表達(dá)CD14、CD34、CD45、CK7、CK19、CEA;SGC中CEA和CK19均呈陽性表達(dá),證實(shí)獲得的2種細(xì)胞均為純化細(xì)胞。(2)誘導(dǎo)培養(yǎng)1周后,熱損傷組與熱損傷+EGF組UCMSC巾CK7、CK19、CEA陽性表達(dá)率及pERK表達(dá)水平分別為(6.4±0.7)%、(5.7±0.3)%、(7.4±1.0)70、0.790±0.049與(14.3±1.0)%、(12.6±1.1)%、(17.6±2.3)%、1.200±0.032,均顯著高于對(duì)照組的(2.2±1.5)%、(2.2±0.7)%、(3.3±0.7)%、0.640±0.026,F(xiàn)值分別為78.49、139.36、87.13、191.74,P值均小于0.01;熱損傷+EGF組UCMSC各指標(biāo)水平照著高于熱損傷組(F值為50.14~145.47,P值均小于0.01);熱損傷+PD98059組與對(duì)照組UCMSC各指標(biāo)水平相
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