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頜下腺細(xì)胞與絲素-殼聚糖在體內(nèi)復(fù)合培養(yǎng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

摘要:目的探討在絲素一殼聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCS)支架上接種頜下腺細(xì)胞后,在大鼠體內(nèi)構(gòu)建組織工程化頜下腺的可行性及生物學(xué)特性。方法將36只8周齡SD大鼠分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組各18只。取1~3d齡sD大鼠頜下腺原代細(xì)胞培養(yǎng)、傳代、細(xì)胞來(lái)源鑒定后,將第二代細(xì)胞標(biāo)記5-溴-2-脫氧尿嘧啶核苷(5’-BrdU),制備成5×10’個(gè)/L的頜下腺細(xì)胞懸液,將其接種于5mm×5mm×5mm的SFCS上,體外培養(yǎng)1周后將細(xì)胞一支架復(fù)合物植入實(shí)驗(yàn)組,將單純SFCS支架植入對(duì)照組,分別于3、7、14d處死大鼠后取材,進(jìn)行大體、組織學(xué)、免疫組織化學(xué)及掃描電鏡觀察。結(jié)果大體觀察:植人物表面被膜覆蓋,周圍組織反應(yīng)較輕。組織學(xué)觀察:隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞數(shù)逐漸增多,細(xì)胞黏附于材料表面或分散在支架內(nèi),聚集成集落、呈島狀排列,分泌粉染的細(xì)胞外基質(zhì)。BrdU免疫組織化學(xué)觀察:術(shù)后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)均存在陽(yáng)性細(xì)胞。細(xì)胞角蛋白8(cytokeratin 8,CK-8)免疫組織化學(xué)觀察:術(shù)后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)均存在陽(yáng)性細(xì)胞,隨時(shí)間延長(zhǎng)數(shù)目逐漸增多。掃描電鏡觀察:SFCS呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),植入初期的頜下腺細(xì)胞呈圓形、表面光滑、散在的黏附于SFCS表面或網(wǎng)孔內(nèi);隨時(shí)間延長(zhǎng),頜下腺細(xì)胞表面凹凸不平,細(xì)胞數(shù)目增多,黏附于材料表面并伸出突起,細(xì)胞間相互接觸。結(jié)論利用SFCS支架接種頜下腺細(xì)胞后,可在體內(nèi)構(gòu)建組織T程化涎腺樣結(jié)構(gòu),為進(jìn)一步進(jìn)行組織工程化頜下腺的研究奠定理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞:
  • 頜下腺  
  • 組織工程  
  • 絲素  
  • 殼聚糖  
作者:
黃巍巍; 譚學(xué)新; 李波; 王哲; 李欣宇; 馬麗
單位:
中國(guó)醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院口腔解剖生理教研室; 沈陽(yáng)110002
刊名:
中華口腔醫(yī)學(xué)

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中華口腔醫(yī)學(xué)雜志緊跟學(xué)術(shù)前沿,緊貼讀者,國(guó)內(nèi)刊號(hào)為:11-2144/R。堅(jiān)持指導(dǎo)性與實(shí)用性相結(jié)合的原則,創(chuàng)辦于1953年,雜志在全國(guó)同類期刊中發(fā)行數(shù)量名列前茅。