摘要:目的探討在絲素一殼聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCS)支架上接種頜下腺細(xì)胞后,在大鼠體內(nèi)構(gòu)建組織工程化頜下腺的可行性及生物學(xué)特性。方法將36只8周齡SD大鼠分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組各18只。取1~3d齡sD大鼠頜下腺原代細(xì)胞培養(yǎng)、傳代、細(xì)胞來(lái)源鑒定后,將第二代細(xì)胞標(biāo)記5-溴-2-脫氧尿嘧啶核苷(5’-BrdU),制備成5×10’個(gè)/L的頜下腺細(xì)胞懸液,將其接種于5mm×5mm×5mm的SFCS上,體外培養(yǎng)1周后將細(xì)胞一支架復(fù)合物植入實(shí)驗(yàn)組,將單純SFCS支架植入對(duì)照組,分別于3、7、14d處死大鼠后取材,進(jìn)行大體、組織學(xué)、免疫組織化學(xué)及掃描電鏡觀察。結(jié)果大體觀察:植人物表面被膜覆蓋,周圍組織反應(yīng)較輕。組織學(xué)觀察:隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)細(xì)胞數(shù)逐漸增多,細(xì)胞黏附于材料表面或分散在支架內(nèi),聚集成集落、呈島狀排列,分泌粉染的細(xì)胞外基質(zhì)。BrdU免疫組織化學(xué)觀察:術(shù)后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)均存在陽(yáng)性細(xì)胞。細(xì)胞角蛋白8(cytokeratin 8,CK-8)免疫組織化學(xué)觀察:術(shù)后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)均存在陽(yáng)性細(xì)胞,隨時(shí)間延長(zhǎng)數(shù)目逐漸增多。掃描電鏡觀察:SFCS呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),植入初期的頜下腺細(xì)胞呈圓形、表面光滑、散在的黏附于SFCS表面或網(wǎng)孔內(nèi);隨時(shí)間延長(zhǎng),頜下腺細(xì)胞表面凹凸不平,細(xì)胞數(shù)目增多,黏附于材料表面并伸出突起,細(xì)胞間相互接觸。結(jié)論利用SFCS支架接種頜下腺細(xì)胞后,可在體內(nèi)構(gòu)建組織T程化涎腺樣結(jié)構(gòu),為進(jìn)一步進(jìn)行組織工程化頜下腺的研究奠定理論基礎(chǔ)。
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