摘要：目的探討miRNA-1236對結(jié)直腸癌細胞增殖的作用及其相關(guān)機制。方法通過實時定量PCR檢測轉(zhuǎn)染miR-1236后miRNA-1236的表達,使用CCK-8以及克隆形成方法檢測轉(zhuǎn)染miRNA-1236后HCT116細胞的活性,ki67方法檢測轉(zhuǎn)染miRNA-1236后HCT116細胞增殖能力的變化,生物信息方法篩選miR-1236的潛在靶基因FOXO3a。Luciferase報告檢測miRNA-1236與FOXO3a的結(jié)合位點,通過實時定量PCR方法檢測轉(zhuǎn)染miRNA-1236后FOXO3a基因的變化;通過免疫組化的方法檢測結(jié)直腸癌患者組織中FOXO3a的表達,通過western blot檢測低表達miRNA-1236后HCT116細胞中FOXO3a、PCNA以及Bax蛋白的變化。通過TCGA數(shù)據(jù)庫檢測FOXO3a基因在結(jié)直腸癌患者癌-癌旁,不同腫瘤階段與不同性別中的表達。結(jié)果本研究發(fā)現(xiàn)高表達miRNA-1236后HCT116細胞活性相對于陰性對照組明顯增加,而低表達miRNA-1236后活性降低。低表達miRNA-1236后HCT116細胞增殖能力相對于陰性對照組明顯降低。生物信息學預測miR-1236與FOXO3a有潛在的結(jié)合位點。采用Western blot以及逆轉(zhuǎn)錄實時定量PCR驗證,過表達miRNA-1236后FOXO3a表達相對于陰性對照組明顯降低,而低表達miRNA-1236后,FOXO3a表達明顯升高,同時luciferase結(jié)果顯示,FOXO3a是miRNA-1236的靶基因。并且,FOXO3a在結(jié)直腸癌癥組織中明顯降低。結(jié)論miR-1236通過靶向FOXO3a的表達調(diào)節(jié)結(jié)直腸癌細胞HCT116增殖,同時為miR-1236成為診斷、預防以及治療結(jié)直腸癌的生物學標記物提供理論基礎(chǔ)。
注：因版權(quán)方要求，不能公開全文，如需全文，請咨詢雜志社
