摘要:目的探討柴胡皂甙-d(SSd)對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞惡性表型的逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制。方法常規(guī)培養(yǎng)HepG2細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法觀察SSd不同濃度、作用不同時(shí)間對(duì)HepG2細(xì)胞增殖情況的影響。實(shí)驗(yàn)組選擇10mg/L的SSd作用HepG2細(xì)胞48h,Giemsa染色法觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變;化學(xué)發(fā)光法測(cè)定細(xì)胞上清液中甲胎蛋白(AFP)濃度;放射免疫法檢測(cè)細(xì)胞上清液中白蛋白濃度;transwell小室實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移率;RT—PCR檢測(cè)p27基因mRNA表達(dá)。并與空白對(duì)照組做比較。數(shù)據(jù)在多組間比較采用隨機(jī)分組單因素方差分析,在兩組間比較采用t檢驗(yàn)。結(jié)果10mg/L的SSd作用48h,對(duì)HqoG2細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制最明顯(F=266.06,P〈0.01)。實(shí)驗(yàn)組HepG2細(xì)胞形態(tài)傾向于正常分化,形態(tài)變小、變圓,核變小、變圓或卵圓形,核/質(zhì)比例縮小。與對(duì)照組比較,實(shí)驗(yàn)組穿膜細(xì)胞數(shù)明顯減少[(50.60±4.04)個(gè)與(41.00±4.64)個(gè),t=-7.32,P〈0.01);細(xì)胞上清液中自蛋白含量明顯增多[(24.7±2.8)×10-3g/L與(31.1±4.9)×10-3g/L,t=7.83,P〈0.051;AFP含量明顯減少[(118.2±15.6)×10^3μg/L與(70.3士5.7)×10^3μg/L,t=-10.72,P〈0.01]。實(shí)驗(yàn)組p27基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量明顯多于對(duì)照組(t=22.00,P〈0.05)。結(jié)論SSd對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞惡性表型具有明顯的逆轉(zhuǎn)作用,其機(jī)制可能與SSd上調(diào)HepG2細(xì)胞p27基因mRNA表達(dá)使其進(jìn)入分化過程有關(guān)。
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