摘要:目的探討骨髓活檢組織行EBV encoded RNA(EBER)原位雜交檢測的影響因素,優(yōu)化檢測條件以期提高骨髓活檢組織中EB 病毒的檢出率。方法收集35 例EB 病毒相關(guān)疾病的骨髓活檢標(biāo)本,通過對比實驗,比較不同脫鈣方法、不同蛋白酶K 消化條件、不同抗體孵育溫度下的骨髓活檢組織行EBER 原位雜交檢測的切片質(zhì)量、脫片率及染色質(zhì)量情況。結(jié)果脫鈣以運用改良EDTA 脫鈣液脫鈣20~24h 后流水沖洗30min~1h 最佳;蛋白酶K 消化時間為9min 的組織切片脫片率低,雜交效果最好,陽性細(xì)胞著色深,定位準(zhǔn)確;在37℃條件下進(jìn)行抗體孵育雜交染色質(zhì)量為佳。結(jié)論選取合適的脫鈣方式,延長蛋白酶K 消化時間,選擇最佳抗體孵育溫度,可降低脫片率,顯著提高骨髓活檢組織行EBER 原位雜交檢測的染色質(zhì)量,為EBV 相關(guān)疾病的診斷和鑒別診斷提供重要依據(jù)。
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