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摘要：目的建立一種快速、特異、靈敏的熒光PCR方法檢測(cè)巴西孢子絲菌。方法比對(duì)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中所有巴西孢子絲菌內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(internal transcribed spacer,ITS)序列,在保守區(qū)域設(shè)計(jì)并合成特異性引物和探針,建立并優(yōu)化熒光PCR檢測(cè)方法。對(duì)優(yōu)化后的方法使用標(biāo)準(zhǔn)濃度核酸進(jìn)行擴(kuò)增效率、靈敏度及特異度評(píng)價(jià)。通過(guò)巴西孢子絲菌小鼠感染模型,與組織培養(yǎng)比較,對(duì)本研究中的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果建立的實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)巴西孢子絲菌的檢測(cè)限為100fg。該方法對(duì)申克孢子絲菌、球形孢子絲菌、其他常見(jiàn)致病真菌28種、常見(jiàn)細(xì)菌3種以及人類基因組和小鼠基因組擴(kuò)增結(jié)果均為陰性,特異度為100%。對(duì)巴西孢子絲菌感染小鼠腦、肝、肺、脾、腎及淋巴結(jié)檢測(cè)與培養(yǎng)結(jié)果相一致。結(jié)論本研究建立的熒光PCR方法可快速、靈敏、特異地鑒定巴西孢子絲菌,并能夠有效的對(duì)感染小鼠模型標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),有助于孢子絲菌病的早期特異性病原學(xué)診斷。