摘要：試驗(yàn)旨在研究北京鴨肝間充質(zhì)干細(xì)胞(liver mesenchymal stem cells,LMSCs)的分離、培養(yǎng)、鑒定及多向分化潛能等生物學(xué)特性。取孵化19日齡健康鴨胚通過酶消法分離出北京鴨LMSCs,進(jìn)行體外培養(yǎng),通過免疫熒光、RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)對北京鴨LMSCs特異性標(biāo)記物(CD29、CD44、CD71、CD73、CD90、CD105、CD133及CD166)進(jìn)行檢測,因北京鴨LMSCs分離過程中會存在少量造血干細(xì)胞,所以對造血干細(xì)胞特異性標(biāo)記物CD31、CD34進(jìn)行檢測,同時對細(xì)胞進(jìn)行成脂和成骨的分化誘導(dǎo),檢測其多向分化潛能。結(jié)果顯示,通過酶消法獲得的北京鴨LMSCs具有間充質(zhì)干細(xì)胞特異性標(biāo)記物,造血干細(xì)胞特異性標(biāo)記物為陰性表達(dá),證明其為肝間充質(zhì)干細(xì)胞,且向成脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞分化誘導(dǎo)。RT-PCR檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn),成脂分化誘導(dǎo)中,過氧化物酶體增殖因子活化受體-γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)、脂蛋白酶(lipoprotein lipase,LPL)呈陽性表達(dá);成骨分化誘導(dǎo)中,Ⅰ型膠原蛋白(CollagenⅠ)和Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)呈陽性表達(dá)。北京鴨LMSCs較強(qiáng)的自我增殖能力可使畜禽遺傳資源有無限利用的可能性,多向分化潛能強(qiáng)則說明重編程的水平較低,對畜禽種質(zhì)資源的復(fù)原有巨大的優(yōu)勢,為組織再生研究提供了一定的理論基礎(chǔ),對于畜禽資源的開發(fā)與利用打開了一個更為寬廣的平臺。
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