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摘要：為探究H2O2誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮應(yīng)激性衰老中能量代謝和線粒體功能的變化,在H2O2誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老模型中,Western blotting檢測(cè)細(xì)胞衰老指標(biāo)p21、p53、γH2A.X的蛋白表達(dá)水平;檢測(cè)衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶藍(lán)染程度;熒光定量PCR檢測(cè)端粒長(zhǎng)度;利用安捷倫Seahorse XFe 96細(xì)胞能量代謝儀檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的糖酵解情況和氧耗情況;檢測(cè)細(xì)胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、線粒體膜電位及ATP水平;檢測(cè)細(xì)胞能量代謝關(guān)鍵酶的表達(dá)水平。與正常組相比,H 2O 2刺激的內(nèi)皮細(xì)胞中p21、p53、γH2A.X的蛋白表達(dá)明顯上調(diào),衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶藍(lán)染的細(xì)胞比例增加,端粒長(zhǎng)度縮短,衰老內(nèi)皮細(xì)胞糖酵解能力下降,線粒體呼吸功能明顯降低,ROS水平增加,線粒體膜電位下降,ATP生成減少,但大部分能量代謝關(guān)鍵酶的表達(dá)水平不變。因此,內(nèi)皮應(yīng)激性衰老可引起內(nèi)皮能量代謝紊亂及線粒體功能障礙,靶向內(nèi)皮能量代謝及線粒體功能調(diào)節(jié)可能是干預(yù)內(nèi)皮應(yīng)激性衰老的重要策略。