摘要:為了研究使用酵母表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)重組銅綠假單胞菌噬菌體裂解酶的效果,通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)將銅綠假單胞菌噬菌體裂解酶基因ly23克隆至酵母表達(dá)載體pSEP1和pSEP1alpha上,并分別轉(zhuǎn)化至釀酒酵母細(xì)胞,對(duì)胞內(nèi)表達(dá)及分泌表達(dá)重組噬菌體裂解酶LY23的表達(dá)水平及裂解活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明,用釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng)分泌表達(dá)的LY23粗酶液處理10min后,銅綠假單胞菌菌液的OD620值下降約50%,且比濁法測(cè)定顯示LY23對(duì)銅綠假單胞菌具有較為顯著且專一的裂解活性。本文研究使用酵母表達(dá)系統(tǒng)可分泌表達(dá)具備裂解活性的噬菌體裂解酶,可為后期探討其分離純化提供基礎(chǔ)。
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