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鼠疫一體系雙重熒光定量PCR檢測方法的建立及評價

摘要:本研究根據(jù)鼠疫耶爾森氏菌caf1及YPO0392基因,設(shè)計特異性的引物和不同熒光標記的TaqMan熒光探針,構(gòu)建一體系的檢測體系,對其敏感性、特異性和穩(wěn)定性進行評價,并對8份鼠疫陽性及24份陰性DNA樣本進行應(yīng)用評價。結(jié)果顯示,一體系雙重檢測鼠疫DNA的敏感度為17.93×10^-5 ng/μL;19份鼠疫菌DNA都有擴增,25份非鼠疫菌DNA都未擴增;對8份陽性現(xiàn)場DNA樣本進行檢測,一體系檢測結(jié)果均為陽性;對24份陰性DNA樣本進行檢測,結(jié)果均為陰性。結(jié)果表明,本研究成功建立了可同時檢測鼠疫耶爾森氏菌caf1和YPO0392基因的一體系雙重熒光定量PCR方法,具有良好的敏感性與特異性,操作方便并節(jié)約成本,能夠代替單基因檢測方法。

關(guān)鍵詞:
  • 鼠疫耶爾森氏菌  
  • caf1  
  • tpo0392  
  • 雙重熒光定量pcr方法  
作者:
董珊珊; 段存娟; 郭英; 石麗媛; 鐘佑宏; 李偉; 王鵬
單位:
云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控技術(shù)重點實驗室云南公共衛(wèi)生與疾病防控協(xié)同創(chuàng)新中心; 大理671000; 中國疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所傳染病預(yù)防控制國家重點實驗室; 北京102206
刊名:
中國動物傳染病學報

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中國動物傳染病學報緊跟學術(shù)前沿,緊貼讀者,國內(nèi)刊號為:31-2031/S。堅持指導(dǎo)性與實用性相結(jié)合的原則,創(chuàng)辦于1993年,在全國同類期刊中發(fā)行數(shù)量名列前茅。