摘要:本研究根據(jù)鼠疫耶爾森氏菌caf1及YPO0392基因,設(shè)計特異性的引物和不同熒光標記的TaqMan熒光探針,構(gòu)建一體系的檢測體系,對其敏感性、特異性和穩(wěn)定性進行評價,并對8份鼠疫陽性及24份陰性DNA樣本進行應(yīng)用評價。結(jié)果顯示,一體系雙重檢測鼠疫DNA的敏感度為17.93×10^-5 ng/μL;19份鼠疫菌DNA都有擴增,25份非鼠疫菌DNA都未擴增;對8份陽性現(xiàn)場DNA樣本進行檢測,一體系檢測結(jié)果均為陽性;對24份陰性DNA樣本進行檢測,結(jié)果均為陰性。結(jié)果表明,本研究成功建立了可同時檢測鼠疫耶爾森氏菌caf1和YPO0392基因的一體系雙重熒光定量PCR方法,具有良好的敏感性與特異性,操作方便并節(jié)約成本,能夠代替單基因檢測方法。
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