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豬繁殖與呼吸綜合征病毒非結(jié)構(gòu)蛋白2分段真核表達(dá)及其細(xì)胞定位分析

摘要:為探討非結(jié)構(gòu)蛋白2(non-structural protein 2,NSP2)在豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)復(fù)制過(guò)程中的作用及機(jī)制,本研究構(gòu)建真核重組質(zhì)粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至HEK 293T中,同時(shí)設(shè)置完整NSP2基因序列重組質(zhì)粒作為對(duì)照,轉(zhuǎn)染48 h后分別用不同的抗體進(jìn)行間接免疫熒光監(jiān)測(cè)。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染對(duì)照組中細(xì)胞核周圍可見(jiàn)特異性熒光,而轉(zhuǎn)染真核重組質(zhì)粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323后,不僅在細(xì)胞核周圍,在細(xì)胞核內(nèi)也可以觀察到特異性熒光。本研究成功構(gòu)建真核重組質(zhì)粒pcDNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并可在HEK 293T細(xì)胞中正確表達(dá),為進(jìn)一步研究NSP2在PRRSV復(fù)制過(guò)程中的作用提供依據(jù)和基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞:
  • 豬繁殖與呼吸綜合征病毒nsp2  
  • 真核質(zhì)粒  
  • 轉(zhuǎn)染  
  • 間接免疫熒光檢測(cè)  
作者:
徐麗; 溫貴蘭; 管國(guó)丹; 張升波; 李昌紅; 林漢卿; 楊佰啟; 田浪
單位:
貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院; 貴陽(yáng)550025; 貴州省動(dòng)物疫病與獸醫(yī)公共衛(wèi)生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 貴陽(yáng)550025
刊名:
中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)

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中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)緊跟學(xué)術(shù)前沿,緊貼讀者,國(guó)內(nèi)刊號(hào)為:31-2031/S。堅(jiān)持指導(dǎo)性與實(shí)用性相結(jié)合的原則,創(chuàng)辦于1993年,在全國(guó)同類期刊中發(fā)行數(shù)量名列前茅。