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摘要：目的測(cè)定IFN-λ1在CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK等4種不同種屬來(lái)源細(xì)胞中的抗病毒活性。方法利用RT-PCR技術(shù)從人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞(CaCo2)中擴(kuò)增獲得人IFN-λ1 (HuIFN-λ1)基因,然后克隆至真核表達(dá)載體pCDNA3.1-Flag-HA中,通過(guò)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、陽(yáng)性菌落篩選、質(zhì)粒提取及測(cè)序,獲得重組質(zhì)粒pCDNA3.1-HuIFN-λ1;利用脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染293細(xì)胞,48 h后通過(guò)Western blot檢測(cè)HuIFN-λ1瞬時(shí)表達(dá)情況,取轉(zhuǎn)染后上清分別作用于CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK等四種不同種屬來(lái)源細(xì)胞進(jìn)行HuIFN-λ1抗病毒活性分析。結(jié)果從人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞中擴(kuò)增獲得HuIFN-λ1基因,大小為600 bp,并在293細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)HuIFN-λ1,表達(dá)產(chǎn)物能抑制VSVG在CaCo2、Vero、BHK-21、MDCK中的增殖,流式細(xì)胞儀檢測(cè)經(jīng)HuIFN-λ1處理的上述細(xì)胞熒光率分別為73.69%、80.12%、71.73%、69.47%。結(jié)論重組表達(dá)的人IFN-λ1蛋白對(duì)4種不同種屬來(lái)源的細(xì)胞均存在一定的抗病毒活性,為研究人IFN-λ1在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用機(jī)制及其應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。