摘要:目的探討TBX15基因在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其啟動(dòng)子甲基化對(duì)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法分別采用亞硫酸氫鹽測(cè)序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)檢測(cè)3種肝癌細(xì)胞系(HepG2、MHCC97H、SNU449)中TBX15基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)和表達(dá)水平,再將空白質(zhì)粒、空載質(zhì)粒pc3.1和TBX15過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染肝癌SNU499細(xì)胞,通過(guò)CCK-8實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組肝癌細(xì)胞的增殖和凋亡情況。結(jié)果 3種肝癌細(xì)胞系中,TBX15基因在肝癌SNU449細(xì)胞中的啟動(dòng)子甲基化程度最高,甲基化率為89.5%,而TBX15 mRNA表達(dá)水平最低。TBX15過(guò)表達(dá)質(zhì)粒組培養(yǎng)48 h后,肝癌SNU449細(xì)胞的增殖能力高于空載質(zhì)粒組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.549±0.080 vs 0.457±0.506,P=0.015);TBX15過(guò)表達(dá)質(zhì)粒組肝癌SNU449細(xì)胞的總凋亡比例高于空白質(zhì)粒組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(5.12±1.42)%vs(2.16±0.41)%,P=0.014]。結(jié)論啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化可能是肝癌細(xì)胞TBX15基因失活的主要原因,且與肝癌惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)。TBX15可能是預(yù)測(cè)肝癌發(fā)生發(fā)展的指標(biāo)。
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