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摘要：以中醫(yī)臨床治療乳腺增生的首選中成藥小金丸為例,對(duì)比生物活性檢定與化學(xué)指紋圖譜在小金丸整體質(zhì)量評(píng)價(jià)中的適宜性與科學(xué)性。測(cè)定小金丸抗血小板聚集生物效價(jià)與環(huán)氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制率,建立小金丸脂溶性和水溶性雙部位指紋圖譜,對(duì)A、B 2個(gè)廠家16個(gè)批次市售小金丸進(jìn)行指紋圖譜分析,對(duì)比研究小金丸在生物活性和化學(xué)分析層面的一致性。本研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案已獲成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)(批準(zhǔn)號(hào):2018BL-002)。結(jié)果表明,16個(gè)批次小金丸的抗血小板聚集生物效價(jià)在0.712~1.278 U·mg^-1,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為15.4%;COX-2抑制率在52.07%~68.95%,RSD為8.91%,結(jié)果顯示生物效應(yīng)差異較小,生物活性一致性較好。16個(gè)批次小金丸指紋圖譜相似度差,近一半樣品相似度小于0.9,共有峰峰面積在各樣品中RSD達(dá)32.74%~165.37%,化學(xué)一致性差。為探究小金丸生物活性一致性好而化學(xué)一致性差的原因,對(duì)指紋圖譜色譜進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析,篩選影響相似度的主要色譜峰,并進(jìn)行色譜峰藥材歸屬指認(rèn)。結(jié)果顯示各批次小金丸的相似度主要受脂溶性指紋圖譜中面積較大的17、18、20、23、27號(hào)色譜峰,水溶性部分30號(hào)峰的影響,經(jīng)鑒定這些色譜峰屬于楓香脂和當(dāng)歸。進(jìn)一步研究不同濃度楓香脂、當(dāng)歸抗血小板聚集與抑制COX-2活性的作用,結(jié)果表明在小金丸組方比例下,楓香脂、當(dāng)歸幾乎沒有抗血小板聚集和抑制COX-2活性的作用。本研究發(fā)現(xiàn)化學(xué)指紋圖譜用于小金丸質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)存在一定的局限性,部分豐度高、光譜響應(yīng)強(qiáng)、活性弱的色譜峰成為影響評(píng)價(jià)結(jié)果的主要因素,選擇反映臨床功效的生物評(píng)價(jià)方法能很好彌補(bǔ)化學(xué)評(píng)價(jià)方法的不足,為復(fù)雜中成藥的整體質(zhì)量評(píng)價(jià)提供新思路與方法。