摘要:本研究以海生紅藻多管藻(Polysiphoniaurceolata)為材料,用DEAESepharoseFastFlow離子交換層析和ButylSepharose4FastFlow疏水作用層析,從SephacryS-300(S-300)凝膠過濾所得R-藻紅蛋白中分離純化出在帶電性和疏水性表現(xiàn)結(jié)構(gòu)特性差異的2種R-藻紅蛋白組分,R-PEI和R-PEII。這2種R-藻紅蛋白在非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native-PAGE)和非變性等電聚焦(nativeisoelectricfocusing,Native-IEF)中均表現(xiàn)單一條帶,等電點(diǎn)(pI)分別為R-PEI4.7,R-PEII4.6。R-PEI和R-PEII有著相同的熒光光譜和400~750nm吸收光譜,僅在波長小于400nm時(shí)R-PEI表現(xiàn)出大于R-PEII的紫外光吸收。SDS-PAGE多肽組成分析結(jié)果證明,R-PEI和R-PEII不僅有相同的α、β、γ等有色亞基,而且含有相同無色多肽。這些結(jié)果表明,R-PEI和R-PEII來自于多肽鏈的結(jié)構(gòu)特性變化,沒有對(duì)R-藻紅蛋白各亞基的發(fā)色團(tuán)構(gòu)象及其微環(huán)境產(chǎn)生明顯影響。
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