摘要：探討蒲公英皂苷在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞中的抗炎能力,并闡明其活性的基本分子機(jī)制。利用LPS刺激RAW264.7細(xì)胞建立體外炎癥模型,采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測蒲公英皂苷對RAW264.7細(xì)胞的增殖毒性,Griess reagent 法檢測一氧化氮(nitric oxide,NO)的分泌,反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測炎癥細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α mRNA以及INOS mRNA的表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附測定法測定IL-6和TNF-α的分泌量,Western blot檢測IκB-α蛋白的磷酸化水平,用以研究蒲公英皂苷對 NF-κB 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的抑制作用。結(jié)果表明:蒲公英皂苷能夠抑制NO的分泌,顯著抑制IL-6、TNF-α和 INOS mRNA的表達(dá)并且抑制了IL-6和TNF-α的分泌。蒲公英皂苷顯著上調(diào)了IκB-α的蛋白表達(dá),并顯著下調(diào)了p-IκB-α的蛋白表達(dá)且與蒲公英皂苷濃度成正比。蒲公英皂苷通過抑制NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑而發(fā)揮抗炎作用,蒲公英皂苷有顯著的體外抗炎效果且抗炎效果與蒲公英皂苷的濃度呈劑量依賴性。
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