摘要：目的:本研究利用CRISPR/Cas9構(gòu)建穩(wěn)定遺傳的斑馬魚(yú)TYRO3純合突變體,為利用斑馬魚(yú)研究TYRO3功能構(gòu)建模型。方法:通過(guò)PCR和測(cè)序鑒定基因型,篩選獲得TYRO3基因突變斑馬魚(yú)。通過(guò)觀察斑馬魚(yú)水腫的表型以及用透射電鏡觀察足突融合的情況了解TYRO3突變的影響。結(jié)果:我們得到了兩個(gè)移碼的TYRO3突變體,每個(gè)TYRO3突變體在F2中獲得2和5個(gè)純合子,并且F0雜合子突變率可達(dá)50%。TYRO3基因突變斑馬魚(yú)出現(xiàn)卵黃囊、心包及眼周水腫,電鏡下出現(xiàn)明顯的足突融合。結(jié)論:本研究成功構(gòu)建了TYRO3基因突變的純合子斑馬魚(yú),并初步證實(shí),TYRO3突變會(huì)導(dǎo)致斑馬魚(yú)腎臟足細(xì)胞損傷。
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