摘要:在遼寧省沈陽市遼中設(shè)施蔬菜產(chǎn)區(qū)采集到疑似感染番茄褪綠病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)和番茄黃化曲葉病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的番茄樣品,利用ToCV的特異性引物ToC5/ToC6進(jìn)行RT-PCR檢測,結(jié)果從4份病樣中檢測到ToCV預(yù)期大小的特異片段。利用ToCV外殼蛋白(coat protein, CP)和熱激蛋白(heat shock protein 70, HSP70)基因的特異性引物進(jìn)行CP基因和HSP70基因擴(kuò)增及序列測定,結(jié)果得到ToCV遼中分離物CP基因和HSP70基因全長分別為774bp(GenBank登錄號(hào):MF278016)和1665bp(GenBank登錄號(hào):MF278017),序列分析結(jié)果表明ToCV遼中分離物的CP核苷酸序列與北京ToCV分離物(KC887999)和河北的ToCV分離物(KP217196)的CP 核苷酸序列的相似性最高,均為99.87%;HSP70核苷酸序列與山東ToCV分離物(KC709510)的HSP70核苷酸序列的相似性最高,為99.76%。同時(shí)該樣品利用背靠背引物TY-F/TY-R對(duì)TYLCV的DNA-A分子進(jìn)行全基因序列擴(kuò)增及序列測定,結(jié)果得到TYLCV遼中分離物的DNA-A分子全基因長度為2784 bp,序列分析結(jié)果表明TYLCV遼中分離物與山東TYLCV分離物(GU199587)的DNA-A分子全基因核苷酸序列的相似性為99.64%。從而證實(shí)了沈陽市遼中區(qū)的番茄受到ToCV與TYLCV復(fù)合侵染。
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