摘要:通過氣質(zhì)聯(lián)用儀和液質(zhì)聯(lián)用儀的非靶向檢測,結(jié)合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判別分析(OPLS-DA)等方法,對日本沼蝦肝胰腺進(jìn)行代謝物分析,以研究在非致死劑量的亞硝酸鹽或氨脅迫下,日本沼蝦肝胰腺新陳代謝的變化。經(jīng)亞硝酸鹽(0.5mg·L^-1,以N計(jì))脅迫2d后,鑒定到具有顯著差異的代謝化合物46個(gè),涉及氨基酸代謝、脂肪酸代謝和甘油磷脂代謝等;pH=9.0時(shí),氨(1.0mg·L^-1,以N計(jì),即非離子氨氮為0.378mg·L^-1)脅迫后,鑒定出顯著差異性代謝化合物52個(gè),涉及三羧酸循環(huán)、氨基酸代謝和甘油磷脂等代謝通路。選擇pH=9.0氨(1.0mg·L^-1)脅迫組對日本沼蝦肝胰腺中的三羧酸循環(huán)進(jìn)行定量驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示,日本沼蝦肝胰腺中草酰乙酸含量與對照組相比在12h顯著升高,24h和48h后則與對照組無顯著差異。α-酮戊二酸含量與對照組相比在12h即有顯著增加,24h含量與對照組相比顯著下降,48h后與對照組相比無明顯差異。推測pH=9.0時(shí)氨氮(1.0mg·L^-1)脅迫12h即會對三羧酸循環(huán)產(chǎn)生影響。
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