摘要：以花生芽下胚軸為實(shí)驗(yàn)材料,篩選出適合花生芽原生質(zhì)體制備的最優(yōu)條件.25℃避光酶解3 cm的花生芽下胚軸,研究酶的種類、濃度及組合;酶解時(shí)間、酶作用的pH值、洗滌液甘露醇濃度及酶解液的離心速度,對(duì)花生芽下胚軸原生質(zhì)體制備的影響.結(jié)果最佳適宜條件為:1%纖維素酶與0.5%果膠酶1∶1混合,原生質(zhì)體產(chǎn)量最多,達(dá)6.4×10~4,活力高達(dá)91%;酶解時(shí)間60 min細(xì)胞數(shù)量最多,60-80 min之內(nèi)酶解,細(xì)胞都有很高活力;酶解pH在5.5-6最好;洗滌液添加甘露醇0.6 mol/L,細(xì)胞原生質(zhì)體數(shù)量與活力最好;離心速度控制在700-900 r/min之間可獲得數(shù)量足活力高的原生質(zhì)體.獲得了花生芽下胚軸原生質(zhì)體分離的單因素最佳條件,為進(jìn)一步多因素正交實(shí)驗(yàn)及原生質(zhì)體培養(yǎng)提供了有效的數(shù)據(jù)和技術(shù)支撐.
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