摘要：哺乳動物中,TRAF 家族相關(guān)的NF-κB 激活因子(TRAF familymember-associated NF-κB activator,TANK)參與調(diào)控核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB)信號通路,在硬骨魚中,最新研究表明TANK 在青魚抗病毒天然免疫反應(yīng)中具有重要的功能,但在模式動物斑馬魚(Danio rerio)中還沒有有關(guān)TANK 的報道。本研究率先在斑馬魚開展TANK 功能研究,克隆并獲得了斑馬魚TANK 基因(Danio rerio TANK,DrTANK),其編碼區(qū)(coding sequence,CDS)包括1 047 個核苷酸,編碼349 個氨基酸。免疫印跡實驗顯示DrTANK 蛋白大小約50 kD;免疫熒光實驗證明DrTANK 主要定位于細(xì)胞質(zhì)中,表明其為一種胞質(zhì)蛋白;雙熒光素酶報告基因研究結(jié)果顯示,在EPC 細(xì)胞中,過表達(dá)DrTANK 并不能顯著上調(diào)干擾素啟動子的表達(dá),但聚肌胞苷酸[poly (I:C)]和草魚呼腸孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)的刺激能顯著增強其誘導(dǎo)干擾素啟動子的表達(dá)活性。本研究結(jié)果表明DrTANK在斑馬魚抗病毒天然免疫反應(yīng)中可能具有重要作用,為后續(xù)DrTANK 功能研究奠定了基礎(chǔ)。
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