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摘要：【目的】克隆油茶CoFAD2-1基因,并進(jìn)行亞細(xì)胞定位和組織表達(dá)研究?！痉椒ā坎捎肅TAB法提取油茶4種組織中的總RNA;運(yùn)用RT-PCR方法,設(shè)計(jì)基因特異性引物,從油茶未成熟胚中克隆CoFAD2-1基因;用生物信息學(xué)手段分析了CoFAD2-1基因的結(jié)構(gòu)和進(jìn)化關(guān)系;利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究CoFAD2-1基因在不同組織的表達(dá);同時(shí)運(yùn)用煙草瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)對(duì)該基因進(jìn)行亞細(xì)胞定位分析?！窘Y(jié)果】該基因編碼區(qū)全長為1 149 bp,共編碼382個(gè)氨基酸,具有FAD2基因家族保守的3個(gè)組氨酸簇。系統(tǒng)樹分析顯示該基因與種子特異表達(dá)的FAD2基因聚在一起,組織表達(dá)分析也表明CoFAD2在種子中特異表達(dá),轉(zhuǎn)化煙草葉片驗(yàn)證CoFAD2-1蛋白定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。【結(jié)論】CoFAD2-1基因在種子中特異性表達(dá),且定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。