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摘要：鰓是魚類滲透壓調(diào)節(jié)的主要器官,鰓細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)的建立可以為魚類滲透壓調(diào)節(jié)機(jī)理研究提供重要的實(shí)驗(yàn)手段和研究方法。金錢魚(Scatophagus argus)作為一種廣鹽性魚類,是研究滲透壓調(diào)節(jié)機(jī)制的理想動(dòng)物模型。本研究采用胰蛋白酶消化法進(jìn)行了金錢魚鰓細(xì)胞的體外培養(yǎng),確定該類細(xì)胞原代和傳代培養(yǎng)的最優(yōu)條件,分析了其生長(zhǎng)特性。結(jié)果表明,金錢魚鰓細(xì)胞系在28℃,含有20%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的L-15培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最佳,2~4d即可傳代,傳代后可穩(wěn)定培養(yǎng),命名為SG。在傳代培養(yǎng)過程中,對(duì)其增殖情況進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)SG細(xì)胞群體倍增時(shí)間為40.8h。正常傳代的SG細(xì)胞凍存、復(fù)蘇后,經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)得細(xì)胞存活率約為87%。鰓細(xì)胞直接同水體環(huán)境接觸,具有高效的滲透壓調(diào)節(jié)能力。環(huán)境鹽度變化時(shí),鰓細(xì)胞啟動(dòng)滲透壓脅迫應(yīng)答機(jī)制,維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。本研究對(duì)SG細(xì)胞進(jìn)行滲透壓刺激后,檢測(cè)其增殖情況并觀察形態(tài)變化。分析表明,SG細(xì)胞在分別為150和600mOsmol·kg^–1的低滲和高滲脅迫后均可增殖,且低滲脅迫后的增殖速度是高滲脅迫的1.5倍。滲透壓脅迫后SG細(xì)胞的形態(tài)觀察結(jié)果顯示,低滲培養(yǎng)基脅迫后細(xì)胞體積發(fā)生膨脹而高滲條件下細(xì)胞體積發(fā)生皺縮。由此推斷SG細(xì)胞具有較強(qiáng)滲透壓耐受性,且低滲耐受能力強(qiáng)于高滲。SG細(xì)胞系的建立為金錢魚滲透壓應(yīng)答機(jī)制和相關(guān)基因功能的研究提供了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)材料。