摘要：目的觀察Wnt/β-catenin通路的抑制因子DKK-1(Dickkopf-1)在牙囊細胞中的表達,探究在牙囊細胞成骨向分化形成過程中DKK-1的特異性表達機制,探討其與牙齒萌出和頜骨生長發(fā)育的相關(guān)性。方法采用酶消化法分離培養(yǎng)牙囊細胞并純化。將牙囊細胞分為兩組,對照組:普通α-MEM培養(yǎng)基培養(yǎng),實驗組:α-MEM+成骨誘導(dǎo)液培養(yǎng)。分別培養(yǎng)5 d后,采用免疫細胞化學(xué)法觀察DKK-1的表達分布;分別培養(yǎng)10、20 d后采用Western Blot檢測DKK-1、β-catenin、Runx2的蛋白表達水平。結(jié)果免疫組化顯示DKK-1在實驗組表達較對照組減弱。Western Blot檢測結(jié)果示實驗組Wnt通路的關(guān)鍵因子DKK-1條帶蛋白表達明顯下調(diào),β-catenin蛋白及成骨相關(guān)蛋白Runx2的表達明顯上調(diào),培養(yǎng)時間越長實驗結(jié)果與對照組區(qū)別越明顯。結(jié)論 Wnt通路DKK-1在牙囊細胞中有表達且受成骨分化影響,體現(xiàn)Wnt/β-catenin通路中DKK-1的抑制作用,研究結(jié)果將為牙齒萌出和頜骨生長發(fā)育形成機制提供實驗依據(jù)。
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