摘要:生長素響應(yīng)因子(Auxin response factor,ARF)參與調(diào)控植物生長發(fā)育的多個途徑。本研究利用Tail-PCR技術(shù)從雜交鵝掌楸中克隆LhARF2基因5'端上游2637bp序列,即pLhARF2啟動子,并利用生物信息學(xué)軟件PlantCARE分析其包含的調(diào)控元件,發(fā)現(xiàn)其含有啟動子必需元件TATA-box和CAAT-box,以及壓力響應(yīng)、激素響應(yīng)、光信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝循環(huán)過程元件。構(gòu)建pLhARF2-pCAMBIA1300:GUS植物表達載體并瞬時浸染本氏煙草葉片,利用GUS組織化學(xué)染色法鑒定煙草葉片中瞬時表達活性,發(fā)現(xiàn)在煙草葉片中有藍色斑塊,但顏色較淺。實驗結(jié)果推測雜交鵝掌楸pLhARF2啟動子可以調(diào)控GUS基因活性,為下一步研究啟動子遺傳轉(zhuǎn)化的組織表達活性奠定了基礎(chǔ)。
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