摘要:為探討bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族成員MYC2b基因與煙葉中煙堿含量及煙堿含量雜種優(yōu)勢表現(xiàn)的相關(guān)性,利用RT-qPCR分析NtMYC 2 b基因與煙堿合成途徑關(guān)鍵酶基因的表達(dá),測定煙堿含量和煙堿雜種優(yōu)勢表現(xiàn)。結(jié)果表明,移栽后80 d,NtMYC 2 b在煙草親本GDH88和巴斯瑪根部的表達(dá)量較移栽后66 d上調(diào),其根和葉中煙堿含量增加,雜交種根中NtMYC 2 b、鳥氨酸脫羧酶基因(ODC)、精氨酸脫羧酶基因(ADC)、N-甲基轉(zhuǎn)移酶基因(PMT)、N-甲基腐胺氧化酶基因(MPO)的表達(dá)量相對于親本平均表達(dá)量均明顯上調(diào),且除MPO外,NtMYC 2 b與ODC、ADC、PMT、QPT(喹啉酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶基因)在強(qiáng)優(yōu)勢組合VA116×巴斯瑪中的相對表達(dá)量均明顯高于弱優(yōu)勢組合VA116×GDH88,根和葉中煙堿含量及其雜種優(yōu)勢表現(xiàn)也具有相同的趨勢,表明NtMYC 2 b參與了煙堿的合成,還可能參與了煙堿含量雜種優(yōu)勢的形成。相關(guān)性分析表明,在親本根部,NtMYC 2b表達(dá)量與PMT表達(dá)量呈顯著正相關(guān);在雜交種根部,NtMYC2b表達(dá)量與ADC、MPO表達(dá)量呈顯著正相關(guān);在雜交種葉片中,NtMYC2 b表達(dá)量與煙堿含量雜種優(yōu)勢呈顯著正相關(guān),PMT表達(dá)量與ODC、ADC表達(dá)量均呈顯著正相關(guān)。關(guān)鍵酶基因啟動子序列分析表明,ADC中含有1個MYC結(jié)合位點(diǎn)和1個G-box元件;PMT中含有7個MYC結(jié)合位點(diǎn)和1個G-box元件。推測NtMYC 2 b可能通過與ADC、PMT的順式元件MYC結(jié)合位點(diǎn)或G-box元件特異性結(jié)合調(diào)控ADC、PMT的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)煙堿的合成,且NtMYC 2 b還參與了煙堿含量雜種優(yōu)勢的形成。
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