摘要：目的建立用FTA／PCR檢測糞便中隱孢子蟲的技術(shù)，并與常用的商業(yè)化的糞便DNA抽提試劑盒進(jìn)行比較。方法選擇經(jīng)病原學(xué)檢測已經(jīng)確診的隱孢子蟲陽性和陰性糞便，分別采用FTA卡和商業(yè)化DNA抽提試劑盒抽提糞便樣本中DNA，進(jìn)行巢式PCR擴(kuò)增，對PCR陽性產(chǎn)物進(jìn)行測序并利用BLAST在NCBI上與GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對，做同源性分析，確定蟲種。結(jié)果應(yīng)用商業(yè)化DNA抽提試劑盒抽提DNA，無論是否反復(fù)凍融破壁，2個(gè)陽性對照樣本擴(kuò)增出目的片段，另3個(gè)陽性樣本未擴(kuò)增出特異性條帶。樣本純化后應(yīng)用FTA卡抽提DNA進(jìn)行PCR檢測，所有陽性糞樣均擴(kuò)增出830bp左右的目的片段，通過測序和比對，其中2個(gè)為貝氏隱孢子蟲，1個(gè)為火雞隱孢子蟲。結(jié)論應(yīng)用FTA進(jìn)行糞便樣本中隱孢子蟲DNA的抽提方法具有簡單有效、快速靈敏、準(zhǔn)確可靠等特點(diǎn)，可以應(yīng)用于糞便中隱孢子蟲的檢測。
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