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三角褐指藻PtCryP基因的克隆及敲除載體構(gòu)建

摘要：文章旨在獲得三角褐指藻中隱花色素PtCryP的全長(zhǎng)序列并進(jìn)行生物信息分析,且利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)的pKS diaCas-sgRNA質(zhì)粒,通過質(zhì)粒酶切、引物退火、連接重組質(zhì)粒,成功構(gòu)建了三角褐指的敲除載體,并通過DNA測(cè)序確定插入了sgRNA序列。PtCryP基因的開放閱讀框全長(zhǎng)為1575 bp,編碼524個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)的等電點(diǎn)8.30,理論分子量58.98 kD。通過結(jié)構(gòu)域分析,隱花色素蛋白的典型結(jié)構(gòu)域存在于PtCryP蛋白中。本研究首次構(gòu)建了三角褐指藻PtCryP的CRISPR/Cas9敲除載體,為下一步三角褐指藻CryP的表達(dá)和功能研究奠定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：
  • 三角褐指藻  
  • ptcryp基因  
  • 生物信息學(xué)分析  
作者：
趙靖悅; 龔林; 雷娜娜; 陳由強(qiáng); 何文錦
單位：
福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院海洋生物醫(yī)藥與制品產(chǎn)業(yè)化開發(fā)技術(shù)公共服務(wù)平臺(tái); 福建師范大學(xué)南方海洋研究院福建省微藻種質(zhì)改良工程技術(shù)研究中心; 福建福州350117
刊名：
福建輕紡

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期刊名稱：福建輕紡

福建輕紡雜志由福建省輕工業(yè)研究所主辦，福建省輕紡（控股）有限責(zé)任公司主管的學(xué)術(shù)刊物，國(guó)內(nèi)刊號(hào)為：35-1154/TS。創(chuàng)辦于1988年，月刊，在全國(guó)同類期刊中發(fā)行數(shù)量名列前茅。其主要欄目有：政策法規(guī)、卷首語、行業(yè)資訊、論文等。