摘要：對福建省漳州市某水產(chǎn)養(yǎng)殖場發(fā)生的疑似病毒性神經(jīng)壞死病的病魚進(jìn)行病原分離和鑒定.從出現(xiàn)疑似病毒性神經(jīng)壞死病癥狀的石斑魚苗上取眼部、腦部組織進(jìn)行研磨,將勻漿液接種到條紋月鱧細(xì)胞系(SSN)細(xì)胞株SSN-1及其克隆細(xì)胞株E-11,兩株細(xì)胞均出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變,細(xì)胞腫脹變圓,呈空泡化并脫落,E-11細(xì)胞較SSN-1細(xì)胞更早出現(xiàn)細(xì)胞病變,且病變更明顯.將病魚眼部、腦部組織的研磨液、細(xì)胞培養(yǎng)上清進(jìn)行RT-PCR檢測,均檢測出病毒性神經(jīng)壞死病病毒(VNNV)的特異性條帶,目的片段大小為427bp,序列比對結(jié)果提示該病原為赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒(RGNNV).電鏡觀察結(jié)果顯示,細(xì)胞培養(yǎng)上清中存在直徑約30nm的病毒顆粒,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)大量病毒顆粒聚集成團(tuán),細(xì)胞器受損,細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞.將分離得到的VNNV進(jìn)行溫度、酸堿度敏感性試驗,結(jié)果顯示:50℃下處理30min后該病毒滴度明顯下降,60℃處理30min后病毒失活;在pH為3、11的條件下病毒滴度均明顯下降.
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