摘要：通過生物信息學(xué)鑒定了油菜中的突觸融合蛋白BnSYP122,其由一個(gè)N端syntaxin結(jié)構(gòu)域、一個(gè)典型的SNARE基序及一個(gè)C端跨膜結(jié)構(gòu)域組成,并且N端結(jié)構(gòu)域包含被稱為Ha、Hb、Hc基序的3個(gè)α-螺旋束.進(jìn)一步利用Gateway技術(shù)成功將目的蛋白構(gòu)建于植物表達(dá)載體pEarleyGate104上,與帶有綠色熒光蛋白的pEGAD分別轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌GV3101菌株,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的真空滲透法在油菜葉片中進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá).經(jīng)激光共聚焦顯微鏡觀察和Westernblot檢測表明,農(nóng)桿菌介導(dǎo)的真空滲透法能夠在油菜葉片中成功表達(dá)目的蛋白,同時(shí)驗(yàn)證了BnSYP122定位在細(xì)胞膜上.
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