摘要：為獲得一種安全、高效的舒伯特氣單胞菌(Aeromanas schubertii)弱毒疫苗候選株,通過魚體攻毒實(shí)驗(yàn)篩選天然弱毒株,用篩選的弱毒株制備弱毒疫苗,對(duì)雜交鱧進(jìn)行免疫后,采用熒光定量RT-PCR方法評(píng)價(jià)免疫相關(guān)基因表達(dá)情況,同時(shí)采用強(qiáng)毒株攻毒免疫的雜交鱧測(cè)定相對(duì)免疫保護(hù)率(relative percentage survival,RPS),綜合評(píng)價(jià)弱毒株作為活疫苗侯選株的潛力。結(jié)果顯示:篩選到一株舒伯特氣單胞菌天然弱毒株OM170701,其對(duì)靶動(dòng)物雜交鱧與非靶動(dòng)物大口黑鱸均無明顯致病性;該弱毒疫苗候選株能誘導(dǎo)雜交鱧肝臟中IL-8、IL-1β、補(bǔ)體C3表達(dá)量上調(diào),免疫后72 h相對(duì)表達(dá)量達(dá)到最高,分別是對(duì)照組的相對(duì)表達(dá)量的4.95倍、5.57倍、3.94倍;免疫組IgM的相對(duì)表達(dá)量顯著高于對(duì)照組,其中第28天時(shí)免疫組IgM相對(duì)表達(dá)量是對(duì)照組的17.26倍;攻毒后免疫組成活率顯著高于對(duì)照組,其RPS為65%。結(jié)果表明,該弱毒株通過注射免疫能引發(fā)雜交鱧非特異性和特異性免疫應(yīng)答,并提供良好的免疫保護(hù)。
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