摘要：丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)在糖酵解最后一步起著不可逆的作用,可以催化磷酸烯醇式丙酮酸將高能磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移給ADP生成ATP和丙酮酸。通過在NCBI和家蠶微孢子蟲(Nosema bombycis)數(shù)據(jù)庫中對丙酮酸激酶基因的比對分析,選擇家蠶微孢子蟲丙酮酸激酶M2亞型的一個基因(NbPK-2,GenBank登錄號EOB11679.1)進(jìn)行克隆。生物信息學(xué)分析顯示,該基因序列長度為1 359 bp,包含一個完整的開放閱讀框,編碼452個氨基酸,預(yù)測蛋白質(zhì)等電點為7.13,相對分子質(zhì)量為51.7 kD,沒有信號肽;NbPK-2蛋白的二級結(jié)構(gòu)預(yù)測顯示其含有38%的螺旋、21%的延伸片段和40%無規(guī)則卷曲。通過qRT-PCR檢測感染微孢子蟲后家蠶不同發(fā)育時期的NbPK-2表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)該基因在感染后24 h內(nèi)處于相對較高的表達(dá)水平,而此后表達(dá)水平開始降低,至144 h達(dá)到最低值,在168 h又有所升高。研究結(jié)果可促進(jìn)對家蠶微孢子蟲糖酵解途徑的研究,為家蠶微粒子病的防控奠定理論基礎(chǔ)。
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