摘要:目的利用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)(MALDI-TOFMS)建立尿路感染病原菌快速、準(zhǔn)確的鑒定方法。方法收集2017年6月至2018年11月武漢大學(xué)人民醫(yī)院中段尿培養(yǎng)標(biāo)本4493例,采用差速離心法富集細(xì)菌,利用MALDI-TOFMS對(duì)富集后的菌液進(jìn)行快速鑒定,并與傳統(tǒng)培養(yǎng)1~2d后形成的菌落最終鑒定結(jié)果進(jìn)行比較,同時(shí)將尿路感染常見病原菌作倍比稀釋評(píng)估細(xì)菌被鑒定的最低檢測(cè)限度。結(jié)果4493例中段尿標(biāo)本中,775例單一菌感染且細(xì)菌數(shù)≥105cfu/mL的樣本運(yùn)用MALDI-TOFMS直接檢測(cè)出663株菌,尿病原菌直接質(zhì)譜鑒定率為85.55%(663/775),菌株的屬、種鑒定符合率分別為85.55%(663/775)和83.10%(644/775);其中557株革蘭陰性菌屬、種鑒定符合率分別為94.80%(528/557)和94.08%(524/557),159株革蘭陽性菌屬、種鑒定符合率分別為71.07%(113/159)和64.78%(103/159),59例真菌屬、種鑒定符合率分別為37.29%(22/59)和28.81%(17/59)。183例樣本為2種菌混合感染,采用MALDI-TOFMS直接鑒定出136例樣本中的1種優(yōu)勢(shì)菌,直接質(zhì)譜鑒定率為74.32%(136/183),同時(shí)發(fā)現(xiàn)不同濃度的細(xì)菌計(jì)數(shù)與MALDI-TOFMS陽性率有一定的關(guān)系,在1.5×104cfu/mL革蘭陰性菌比革蘭陽性菌的質(zhì)譜鑒定率高。結(jié)論當(dāng)尿液中的細(xì)菌濃度達(dá)到一定的檢測(cè)限度時(shí),MALDI-TOFMS可以直接檢測(cè)其細(xì)菌,且檢出率高、結(jié)果可靠;MALDI-TOFMS對(duì)混合菌感染的樣本也有一定鑒定能力,該方法能夠極大地縮短病原菌的鑒定時(shí)間,為臨床診斷提供有效、準(zhǔn)確、可靠的手段。
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